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【求助】beta-catenin 的表达!

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小妹困惑,在此请教大师!

做了几次beta-catenin的表达(western),都没做出来,目的蛋白的分子量是92,可是,做出来的印记总是在下方,明显的不是目的蛋白的位置。我师兄说,做beta-catenin要提核蛋白才能做出来,可我之前也有做出来过的!请教各位有经验的同志,这样的现象是何解?
不一定要提核蛋白才能出来。b-catenin在核内核外都有分布。应该是你实验过程中的问题。每次实验注意做对照。另外,你的b-catenin的表达是过量表达还是内源的呢?如果内源,适当增加点上样量看看。抗体也需要注意。总之,一切小心,呵呵。
woxingwosu wrote:
不一定要提核蛋白才能出来。b-catenin在核内核外都有分布。应该是你实验过程中的问题。每次实验注意做对照。另外,你的b-catenin的表达是过量表达还是内源的呢?如果内源,适当增加点上样量看看。抗体也需要注意。总之,一切小心,呵呵。


谢谢提点!好吧,我又去重复重复再重复!
familar wrote:
谢谢提点!好吧,我又去重复重复再重复!

楼主后来结果怎样?
细胞系是?一抗是哪个公司的?
楼主,一抗是哪家公司的,急求,联系416698195,谢谢

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