【求助】构建萤光素酶报告基因载体的一个问题
丁香园论坛
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在构建萤光素酶报告基因载体的过程中，我把一个基因的一部分启动子插入到载体中（包含该基因转录起始点），请问是否需要为了避免载体中编码萤光素酶的基因的移码突变，而在转录起始点以下所包含的碱基数必须为3的整倍数呢？比如所包含启动子区域为-1000！~+27（此处是否必须为3的整倍数）
我觉得只要从翻译开始，即ATG， 保持碱基数必须为3的整倍数就可以了。前面的启动子部分没有必要。最好要能保证启动子后面到真正翻译起始之间没有多出ATG，否则翻译出来的就不是萤光素酶，而是从多出的ATG开始翻译了。
不用，直接构建之后从你的目的基因的ATG开始设计克隆，把目的基因片段替换成luciferase基因就行，注意kozake序列AXXATGG
版主zhujoker留言:
老兄，你说的有点答非所问，做启动子的研究是连接在luciferase基因的上游，顺便说一声就是连接启动子不需要考虑移码突变。
老兄，你说的有点答非所问，做启动子的研究是连接在luciferase基因的上游，顺便说一声就是连接启动子不需要考虑移码突变。
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