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【求助】一个关于基因改造的问题,希望各位站友帮帮忙!祝各位国庆快乐!

丁香园论坛

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大家好,由于我的基础不太扎实,希望各位战友能告诉我,这种是什么实验方法。简单说明其过程。1,transgenic mice that overexpress Runx2 under the control of a 2.3-kb mouse Col1a1 promoter。2,In dn-Runx2 transgenic mice under the control of the same
2.3-kb mouse Col1a1 promoter。
问题一,是上面是通过什么方法进行基因改造的,望战友简单说说其过程是怎样的?
问题二,Runx2是一种成骨细胞的一种转录因子。是促进骨髓干细胞向成骨细胞分化和促进成骨 细胞特异蛋白的表达。问题是dn-Runx2是什么东西?它是生物或细胞本来就存在的,还是人为改造的呢?它的中文名应该叫什么?

问题表述的不好希望各位站友原谅,同时希望大家帮帮忙,祝大家国庆快乐!

原文:transgenic mice that overexpress Runx2 under
the control of a 2.3-kb mouse Col1a1 promoter, which
directs reporter gene expression to immature and mature
osteoblasts, show osteopenia with multiple fractures (Liu et
al. 2001; Geoffroy et al. 2002; Kanatani et al. 2006).

In dn-Runx2 transgenic mice under the control of the same
2.3-kb mouse Col1a1 promoter, the volume of the trabecular
bone is increased, and the expression of major bone matrix
protein genes including Col1a1, Spp1, and Bglap, is not
significantly affected compared with those in wild-type mice。
没有看原文的方法,只能根据你的文字试着回答一下。

问题1: 文章是通过转基因的办法把这个RUNX2转到小鼠里面从而达到过表达这个蛋白的作用。做法可能是构建一个质粒,把Col1a1启动子(这个启动子应该是在小鼠能够有很强的启动作用)和RUNX2基因(放在col1a1启动子下游)连接在这个质粒里。构建好质粒后把它注射到小鼠胚胎并并放到鼠子宫里培养成子代。这个基因(包括启动子)会通过基因重组的方式可以整合到小鼠胚胎基因组里面从而可以在子代中表达,这个子代就是带有某种基因的转基因鼠了。

问题2: dn-runx2应该是指dominant negetive-runx2,即是显性负作用突变体的runx2,一般都是人工改造的,顾名思意,这种负作用体通常带着某种缺失如酶功能的缺失等等,是没有功能的,甚至是起负作用的(如它能够结合到本来runx2应该起作用的位置,然后阻碍正常runx2的结合,从而抑制这个基因的作用)。
谢谢·大家的回答,学习到不少。感谢感谢!

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