【求助】信号通路蛋白研究水平问题
丁香园论坛
1986
这个问题可能是因为我基础不好吧,所以一直没弄懂,在研究中DNA/mRNA/蛋白水平的研究有何不同?为什么有些时候用PCR,有时候用RT-PCR,有时候用Western blot?
例如,对于某个信号蛋白,文献报道有突变体,即在其某个外显子上有几个氨基酸的缺失,那么要研究这个突变的蛋白的功能应该在哪个层面呢?应该用WB吧,看其下游信号通路蛋白的表达变化?
那有的文献又报道下游通路的关键蛋白的mRNA的变化,这和WB的蛋白变化有什么区别呢?
谢谢大家耐心解释哈吧,我实在已经糊涂了!
例如,对于某个信号蛋白,文献报道有突变体,即在其某个外显子上有几个氨基酸的缺失,那么要研究这个突变的蛋白的功能应该在哪个层面呢?应该用WB吧,看其下游信号通路蛋白的表达变化?
那有的文献又报道下游通路的关键蛋白的mRNA的变化,这和WB的蛋白变化有什么区别呢?
谢谢大家耐心解释哈吧,我实在已经糊涂了!
我也有此疑惑,同求解!
研究mRNA多半是从转录的机制上进行的研究
其实我们所说的信号传导研究,更多地是关注蛋白(一般为酶)的功能的变化,而不仅仅是表达(RNA or protein level)的变化,事实上,很多信号传导通路,蛋白的表达水平并无变化,但是蛋白(酶)的活性有很大的变化,PI3K/AKT通路就是一个典型的例子。这也是信号传导研究
需要用到很多磷酸化蛋白的抗体的重要原因。
需要用到很多磷酸化蛋白的抗体的重要原因。
顶!!
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