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【求助】检测差异为何要在蛋白和mRNA水平两个进行?

丁香园论坛

14088
问一个比较基础的问题,可能比较弱智
检测差异为何要在蛋白和mRNA水平两个进行?
据我个人理解,mRNA最终也是要翻译成蛋白的,那样的话从蛋白水平检测不是最直接的吗?
mRNA水平是不是多余了?
如果你上课的时候认真一点就知道了有一种叫转录后加工,所以在蛋白水平和mRNA水平表达不可能完全一致的。
因为不懂生物学的各类人群一直以为Gene决定一切,其他的都是臣服于Gene以下,所以觉得其他的都不重要。

实际上任何一步反应、调控,都有自己的存在意义,都受到其他部分的影响,人为的决定谁更高档,谁更值得关注根本就是没有道理的。只能说一部分反应现阶段还不清楚。

所以检测一个分子在更多的水平的情况,是为了真正了解它必须做到的。
主要是看一个基因调控另一个是在哪个水平上调控的。
由于存在转录后调控的方式,如miRNA的调控等,所以mRNA与蛋白之间有时并不一致,尽量都去验证一下,有可能会有意想不到的发现。
蛋白可能被 糖基化,乙酰化,磷酸化,泛素化等等修饰啊。
所以基因水平不能反应一切呢
通常基因表达指的是翻译,即合成蛋白质,对有些基因,如管家基因,通常转录成mRNA水平也可以反映表达水平,用半定量RT-PCR、荧光定量PCR或Northern印迹即可。早期的很多文献可见有用mRNA反映基因表达水平的报道。
George2 wrote:
通常基因表达指的是翻译,即合成蛋白质,对有些基因,如管家基因,通常转录成mRNA水平也可以反映表达水平,用半定量RT-PCR、荧光定量PCR或Northern印迹即可。早期的很多文献可见有用mRNA反映基因表达水平的报道。


菜鸟问一句:请问可以用荧光定量PCR做蛋白表达的鉴定吗?SCI的文章接受么?
barin wrote:
菜鸟问一句:请问可以用荧光定量PCR做蛋白表达的鉴定吗?SCI的文章接受么?

呵呵,如果蛋白能进行PCR扩增的话。。。。。。。。。。。。。。
呵呵,蛋白,PCR扩增
五个字:基因的表达
如果2个品种之间mRNA没有差异,但是该基因编码的蛋白质(酶活力)有显著差异,该如何继续做下去,请提供具体一点的思路,谢谢
如果你有100个样品,做一个96孔板的realtime和western哪个累
holywater wrote:
如果你有100个样品,做一个96孔板的realtime和western哪个累

哪个都不累,只是心太累,只因你在中国.
barin wrote:
菜鸟问一句:请问可以用荧光定量PCR做蛋白表达的鉴定吗?SCI的文章接受么?

荧光定量PCR只能反映目的基因转录的情况,您所引用的内容中指的是管家基因。。。
..............
容易混淆的问题

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