【求助】关于细胞周期阻滞的请教

大家好,本人要做有关射线及药物对肺癌细胞周期阻滞的课题,我查了一些文献,发现无论是射线还是药物,作用前大多细胞一般都处于G0/G1期,及S其,作用后,G0/G1期及G2/M比例升高,表现为阻滞,是否与DNA损伤及激活DNA修复酶有关而导致进入G2/M期.由于我是搞临床的,所以对基础这部分不是特别了解,想请教各位老师及朋友,能否给解释一下相关机制或原理,不胜感激.谢谢

是否与DNA损伤及激活DNA修复酶有关而导致进入G2/M期

这个不好回答呀,你先用microarray之类的手段研究一下全基因组看看吧，或者做蛋白质组分析看看吧。先看表达水平，再看相关性。

接种细胞到板上时候，用无血清培养基，处理后，继续用有血清的 培养基

无论是观察射线还是药物对细胞周期（Cell Cycle）的影响，通常的方法都是先使细胞周期同步化，理论上用无血清培养培养一段时间，但在实际操作时都是采用低浓度血清。一般同步化时间24－36小时（细胞类型不同，同步化时间也会有所不同),同步化后再行放射或加药，如果作用后细胞停留在G1期，说明研究对象（比如说细胞转染了p53基因）存在G1检定点功能（Checkpoint，有人翻译成检验点）；如果细胞停留在G2/M，则说明所研究的药物或基因具有G2/M检定点功能。

引入DNA损伤后，通过Western研究一下跟DNA损伤信号转导有关的蛋白的表达量及修饰程度，通过免疫共沉淀实验研究这些蛋白的相互作用强度是否发生变化，通过免疫荧光实验检测这些蛋白在细胞内的亚显微定位有何变化。比如ATM,ATR,Chk1,Chk2,MDC1,53BP1,MRN complex，p53,p21,cdc25等，其实有很多蛋白都与DNA损伤介导的细胞周期阻滞有关，多查一些文献，再确定具体的研究方向。