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【求助】如何进一步研究定位在线粒体膜上的蛋白基因?

丁香园论坛

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请问,找到一个基因,其蛋白定位在线粒体膜上。如果要进一步研究其功能,有哪些实验方法?谢谢了!
线粒体是细胞进行呼吸的主要场所,在细胞代谢旺盛的需能部位比较集中,其主要功能是进行氧化磷酸化,合成ATP,为细胞生命活动提供直接能量. 催化三羧酸循环、氨基酸代谢、脂肪酸分解、电子传递、能量转换、DNA复制和RNA合成等过程所需要的一百多种酶和辅酶都分布在线粒体中. 这些酶和辅酶的主要功能是参加三羧酸循环中的氧化反应、电子传递和能量转换. 线粒体具有独立的遗传体系,能够进行DNA复制、转录和蛋白质翻译. 线粒体不仅为细胞提供能量,而且还与细胞中氧自由基的生成、细胞凋亡、细胞的信号转导、细胞内离子的跨膜转运及电解质稳态平衡的调控等有关。

面对这些功能,你可能需要选择其中某一个方面或者几个方面进行研究,看这个蛋白质的存在与否对上述线粒体所执行的某几项功能是否有影响。所采取的方法可包括构建移步法突变体、RNAi、加入抑制剂、突变+恢复等,这样可以基本能说明某一个或者两三个方面的问题。

可以借鉴这篇文献: http://www.jbc.org/content/278/42/41566.full

如今有个蛋白质定位数据库。你在这个数据库里面找到定位在线粒体膜上的蛋白,然后借鉴它们的研究成果,看是如何对其功能进行研究的。这个数据库地址是: http://locate.imb.uq.edu.au/
非常感谢iscience
谢谢分享,有点收获

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

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