【求助】合成miRNA与体内生成miRNA发挥功能有异？

实验室看到一个现象，合成miRNA是目的蛋白出现肉眼可辩的下降（WB），但是稳定转染pcDNA－miRNA，目的蛋白没下降了，

是不是两者发挥功能的方式不一致呢？

有一个问题不知道你事先real-time验证你的miRNA表达没有？如果验证了，那么你在做稳转时你应该多挑几个单克隆，看看那个miRNA表达高，而相应的目的蛋白WB下降又比较厉害，这样你的后续实验才有代表性。还有一个问题就是你所谓的“合成miRNA是目的蛋白出现肉眼可辩的下降（WB）”，下降如果没有40%的话还是很难说明问题的，虽然miRNA对机体是一个微调作用，但是你能够反复证明的话也是没有问题的。
祝好运！

转染后筛选克隆的时候，没有挑单克隆

稳定转染的miRNA做定量PCR了，上调几百倍，

这个我们还没有去比较过，都是用合成的。