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【求助】GFP做报告基因的相关问题

丁香园论坛

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请教高人:
我现在想用GFP做报告基因,在大肠杆菌中表达蛋白,想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗?有没有人对GFP基因进行过改造?让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光?
1、如果你单纯想表达GFP蛋白,那么转化含GFP基因的表达载体即行。
2、如果你想表达GFP融合蛋白,那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意的。

3、有人改造GFP基因让其荧光更强,只是改变某些氨基酸,至于GFP长度缩短的改造,我没发现,可能是因为GFP得以激发荧光需要GFP蛋白形成一个桶形结构才行,而不是单纯的具有“生色基团”就行了。
3、有人改造GFP基因让其荧光更强,只是改变某些氨基酸,至于GFP长度缩短的改造,我没发现,可能是因为GFP得以激发荧光需要GFP蛋白形成一个桶形结构才行,而不是单纯的具有“生色基团”就行了。


改造这玩意可不是随便弄得吧。谁都能搞,还怎么得Nobel Price呢。
fishbody wrote:

改造这玩意可不是随便弄得吧。谁都能搞,还怎么得Nobel Price呢。


当然改造不是随随便便能改造的啊,正是因为“有人”发明并改造了才得Nobel price的。:)

如是没有人改造又何来增强型的GFP呢?
Fasta921 wrote:
当然改造不是随随便便能改造的啊,正是因为“有人”发明并改造了才得Nobel price的。:)

如是没有人改造又何来增强型的GFP呢?


都获得诺贝尔奖的成果了,多查查,拿来直接就可以了吧。
fishbody wrote:
都获得诺贝尔奖的成果了,多查查,拿来直接就可以了吧。


我的意思不是叫楼主去改造啊,能随便改的么?现在带有GFP报告基因的载体很成熟的了。
谢谢各位大侠,我在查文献考虑考虑!
Fasta921 wrote:
我的意思不是叫楼主去改造啊,能随便改的么?现在带有GFP报告基因的载体很成熟的了。

俺也是这意思。

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