丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

【求助】凋亡的问题?????

丁香园论坛

1671
我正在做大鼠肝脏组织,现在做凋亡,请问做什么指标?
我打算做DNA Ladder和AnnexV,请问用什么试剂盒比较好,价格先不考虑。
我现在急求大鼠的ALR的序列,请各位多帮助,非常感谢
请大家帮助
:):)感谢大家
Annexin V-FITC/PI 国产晶美的也不错!

你检测的细胞没有其他荧光干扰吧,如果有GFP,不能用FITC,因为它们荧光通道相同。

PS:把我血淋淋的教训告诉你了,呵呵
我做过兔子肝脏凋亡的检测,觉得首先跑电泳检测比较方便
感谢大家!
我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?
我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!

再次感谢大家!
各位大侠:
请问凋亡试剂盒做组织,那家的产品比较好啊 ?
现在急求?
多谢!
ApoAlertTM LM-PCR Ladder Assay (CLONTECH)
优点:敏感度高,适合于检测少量样本,小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。
zhaohu552211 wrote:
感谢大家!
我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?
我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!

再次感谢大家!


兄弟,貌似做AnnexinV国产很多不能做组织,呵呵!我没做过组织,没经验,提供点资料看看!

美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒

产品名称:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
英文名称:Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit
产品分类:细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]
产品编号:A0001c
检验方法:Apoptosis
包 装:20T
产品说明:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述
产品说明
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的变化,而此阶段Propidium Iodide(PI)不能通过细胞膜。细胞坏死时,虽然也会发生磷脂酰丝氨酸外翻,但此时细胞膜的通透性明显增加,PI等核酸染料进入细胞与细胞核中的核酸结合,发出红色荧光。所以Annexin V-FITC(绿色荧光)常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI)合并使用,来区分凋亡细胞与死亡细胞。此试剂盒可用于流式细胞仪和组织切片染色
谢谢大家!

我做的是大鼠的肝脏,样品冻存在-80度,现在想做Tunel的试剂盒和DNA Ladder ,目的是检测凋亡,选择那家的试剂盒比较好呢?现在先不说钱的问题!

再次感谢大家的好心!
TUN EL 技术, 即脱氧核苷酸末端转移酶( Term inal2deoxynucleo t idyl t ran sferase, TdT )介导的x2dU TP 缺口末端标记(TdT 2m ediatedx2dU TP n ick end labeling, TUN EL ) 技术, 是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法, 已广泛用于生物、医学研究领域。

TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL)是一种用来检测细胞凋亡(apoptosis)的分析方法.细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA会碎裂成片段(DNA fragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生,所以可以传达细胞凋亡的讯息.TdT为terminal deoxynucleotidyl transferase,此种酵素可以在没有DNA模板的情形下,连结核甘酸到DNA的3'-OH处.1992年,以色列科学家Gavrieli等人将TdT引为为标定DNA片段的一个酵素,自此衍生出TUNEL此项技术.TUNEL的好处是可以在细胞凋亡发生的早期,即可侦测到DNA片段的产生,并且可以直接使用在组织切片上,观察细胞凋亡发生的位置.所以TUNEL目前为广泛接受与使用的一种细胞凋亡的分析方法.

本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

师兄微信号:shixiongcoming

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序