【求助】高糖条件诱导凋亡，glucose开始是如何进入胞内？
丁香园论坛
2417
最近在做高糖诱导心肌细胞凋亡，多数文献提示用其它糖对照，渗透压不是主要的凋亡诱因。那么胞外的葡萄糖是怎样通过胞膜，哪些特异的通路起作用（培养中没有胰岛素），产生oxidative stress，AGE损害等，诱导ROS，线粒体等导致凋亡？
我找的很多文献基本是在下游的机制，具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作，指教指教。
我找的很多文献基本是在下游的机制，具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作，指教指教。
Can I ask you a question firstly? what kind of cardiomyocyte do you want to use?
对高糖诱导心肌细胞凋亡曾做过一些研究，有一点经验。关键在于所用的心肌细胞种类，新生鼠心肌细胞根本不能诱导出心肌细胞凋亡，需要成年鼠心脏消化分离心肌细胞，再加以培养，这一过程需要较特殊的buffer，费时烧钱，没有一定的手上功夫是做不来的，且国内还无实验室做此方面研究。关于调控心肌细胞凋亡的上游信号通路太多了，如ROS pathway、NAD(P)H oxidase pathway、Ca2+ relative pathway、NO pathway，mitochondria pathway、PI3K/AKT/GSK 等,上述这些是研究的焦点与热点。
谢谢shqling的指点。
我开始是用h9c2细胞株试下，这个方法国外有报道了。实验荧光染色观察没发现很典型的凋亡，做了流式，早晚期总的凋亡率在10%-15%，对照在4%左右，不知有没意义。如果做信号蛋白水平检测，不知道有无结果。现在考虑其他细胞，包括新生和成年鼠的，看看老板的意思了。
我开始是用h9c2细胞株试下，这个方法国外有报道了。实验荧光染色观察没发现很典型的凋亡，做了流式，早晚期总的凋亡率在10%-15%，对照在4%左右，不知有没意义。如果做信号蛋白水平检测，不知道有无结果。现在考虑其他细胞，包括新生和成年鼠的，看看老板的意思了。
请问nydljl，你现在还有没有H9C这株细胞，我的都死光了，但实验还没有作完，所以心里很着急，不知能不能惠赠一管，也可以交换细胞，不胜感谢！
本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号：shixiongcoming
