【求助】高糖条件诱导凋亡,glucose开始是如何进入胞内?
丁香园论坛
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最近在做高糖诱导心肌细胞凋亡,多数文献提示用其它糖对照,渗透压不是主要的凋亡诱因。那么胞外的葡萄糖是怎样通过胞膜,哪些特异的通路起作用(培养中没有胰岛素),产生oxidative stress,AGE损害等,诱导ROS,线粒体等导致凋亡?
我找的很多文献基本是在下游的机制,具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作,指教指教。
我找的很多文献基本是在下游的机制,具体讨论胞外high glucose开始是如何进入的文章较少。不知有没哪位战友做过这方面的工作,指教指教。
Can I ask you a question firstly? what kind of cardiomyocyte do you want to use?
对高糖诱导心肌细胞凋亡曾做过一些研究,有一点经验。关键在于所用的心肌细胞种类,新生鼠心肌细胞根本不能诱导出心肌细胞凋亡,需要成年鼠心脏消化分离心肌细胞,再加以培养,这一过程需要较特殊的buffer,费时烧钱,没有一定的手上功夫是做不来的,且国内还无实验室做此方面研究。关于调控心肌细胞凋亡的上游信号通路太多了,如ROS pathway、NAD(P)H oxidase pathway、Ca2+ relative pathway、NO pathway,mitochondria pathway、PI3K/AKT/GSK 等,上述这些是研究的焦点与热点。
谢谢shqling的指点。
我开始是用h9c2细胞株试下,这个方法国外有报道了。实验荧光染色观察没发现很典型的凋亡,做了流式,早晚期总的凋亡率在10%-15%,对照在4%左右,不知有没意义。如果做信号蛋白水平检测,不知道有无结果。现在考虑其他细胞,包括新生和成年鼠的,看看老板的意思了。
我开始是用h9c2细胞株试下,这个方法国外有报道了。实验荧光染色观察没发现很典型的凋亡,做了流式,早晚期总的凋亡率在10%-15%,对照在4%左右,不知有没意义。如果做信号蛋白水平检测,不知道有无结果。现在考虑其他细胞,包括新生和成年鼠的,看看老板的意思了。
请问nydljl,你现在还有没有H9C这株细胞,我的都死光了,但实验还没有作完,所以心里很着急,不知能不能惠赠一管,也可以交换细胞,不胜感谢!
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