糖发酵试验

实验四十一 糖发酵试验

　　一、目的要求

　　了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。

　　二、基本原理

　　糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。

　　酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[pH5．2（黄色）-6．8（紫色）]，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明，如图Ⅹ-4。

　　三、器材

　　大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支；盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小管），试管架，接种环等。

　　四、操作步骤

　　1、编号

　　用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。

　　2、接种

　　取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，按编号1支接种大肠杆菌，另1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样1支接种大肠杆菌，1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。

　　3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。

　　4．观察结果。

　　五、实验报告

　　结果

　　将实验结果填入下表。“”表示产酸产气；“ ”表示产酸不产气；“-”表示不产酸不产气。