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肿瘤动物模型的建立

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9217

(1)收集

将对数生长的肿瘤细胞收集 , 用无血清基质 10.0ml, 于 1500 转/ 分, 离心3min, 连续洗 3 次, 最后用无血清基质混匀。

(2)计算

用血球计数器计算肿瘤细胞数量( 平均 5 个中方格的细胞计数×104即是肿瘤数/ 毫升) 。

(3)接种

计算完肿瘤细胞总数, 再将肿瘤细胞密度调至 4×106 个/ml, 每只小鼠腋下接种 50ul(即 2×105个肿瘤细胞), 2周左右可扪及肿瘤小节结。一般选取 6-8 周的小鼠,不同的肿瘤细胞接种的数量和动物不一样, 比如 LL/2,B 16, Hep 可接种 C57 和 BAL B/C 小鼠, NS-1,EL-4, C26,Meth A 可接种 BAL B/C 小鼠, H22接种昆明鼠。

(4)尺量

从肿瘤接种后可扪及小结节开始, 每 3 天用游标卡尺量肿瘤纵横大小( 单位:mm), 至少连续一个月时间。

注意:

注意要设计不同的实验组和对照组, 每组动物数一般为 5-10 只, 一般接种肿瘤6-8 周后,小鼠的肿瘤可生长至直径为 15-20mm ( 即小鼠会濒临死亡) 时, 可眼球取血,分离血清并保存血清, 处死小鼠, 取肿瘤组织照相, 取部分肿瘤组织作 冰冻组织切片( 或- 80℃ 保存), 作相应的免疫组织化学染色 , 取部分肿瘤组织用3%中性的甲醛固定, 石腊包埋, 作常规HE 染色。

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