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几种乳腺癌细胞的培养

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我养的细胞都是乳腺癌细胞,以下几种:

1、MCF-7 是一种很好养的人乳腺癌细胞,培养基用DMEM或RPMI1640均可, 10-15%的小牛血清就能长得很好。一般两到三天传一代。传代也很常规。吸出培养基,加入0.25%的胰酶1ml,轻轻晃动培养瓶,使胰酶流遍瓶壁,以去除残余的培养基。再加入2ml胰酶(25ml培养瓶)静置消化2-5min,待细胞缩起变圆,将胰酶吸出加入培养基3ml吹打成单细胞悬液分瓶即可。我一般都不用缓冲液冲洗,而直接用胰酶冲洗一下以去除剩余血清的作用,感觉效果还不错。因为MCF-7消化较快,一般不放到培养箱中消化,以免消化太过。需要注意的是MCF-7生长较快如不及时传代可出现整瓶细胞浮起,一般都来不及抢救。

2、T47D 也是一种人乳腺癌细胞,培养基用DMEM+10-15%的小牛血清,培养方法与MCF-7差不多,但这种细胞传代时间长了会极难养。我曾养过一株新从美国购置的,两三天传一代,长得很旺。后又从国内购买一株时间较长的,要七天传一代,而且很娇气。

3、MA891 鼠乳腺癌细胞,这种细胞比较特殊的是很难消化,容易消化成一团一团的,如果胰酶的量比常用的多三分之一充分预热并放入培养箱中消化就会好的多。传到15-20代细胞就易长成团,从此生长缓慢,形态改变,需要复苏重养。

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