光学显微镜的使用步骤、注意事项和维护保养

一、 操作步骤和注意事项

（一）正置显微镜

1、安放

右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧，距离桌边3～4厘米处。

2、清洁

检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

3、对光

镜筒升至距载物台1～2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。

若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。

4、安装标本

将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。

5、调焦

调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。

操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。

若使用双筒显微镜，如观察者双眼视度有差异，可靠视度调节圈调节。另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。

6、观察

若使用单筒显微镜，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外，虹彩光圈的调节也十分重要。

（1）低倍镜观察

观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。

（2）高倍镜观察

从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。

使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。

转动物镜转换器时，不可用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，转换器螺纹受力不均匀而破坏，最后导致转换器就会报废。

（3）油镜的观察

先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。

使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。

香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。

7、结束操作

观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，反光镜要竖立，降下镜筒，擦抹干净，并套上镜套。

若使用的是带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯。

（二）倒置显微镜

倒置显微镜与正置显微镜的主要区别在于物镜位于载物台下方，这样有利于观察时在上方对样品进行一些实时操作。

倒置显微镜操作过程基本与双筒的正置显微镜相似，需注意以下几点：

观察时可调节铰链式双目目镜至舒适的位置。

组织培养液或水溅到载物台上、物镜上或显微镜镜架上可能会损伤设备。如果溅上后，应该立即从墙上插座拔下电源线，擦去溅出液或水。

一定要轻柔转动光强调节钮，不要试图将旋钮转过终点位置。使用后一定要先将灯的强度调至最小再关电源。

使用后要旋转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。

（三）实体显微镜

又称体视显微镜或解剖显微镜。操作步骤基本和双筒正置显微镜类似：

取用解剖镜时，移动需用双手，保持稳重。若需连镜箱搬动，应将镜箱锁好，同时镜箱的钥匙必须拔除。

镜管上若有防尘罩，应取下并换上目镜及眼罩。

将样品置于玻片上或蜡盘中再放到载物盘上待观察。拧开锁紧螺丝，把镜体先上升到一定高度，然后锁紧镜体。

观察前可先转动目镜管以适合眼间距。双眼视度差异可用视觉圈调节。

对焦时，转动升降螺丝不能太快或强行扭转，谨防损坏齿轮。

如需放大观察，再转动倍率盘直到所需放大倍率。物像越大，光线越暗，必须调好光源选择好背景物。 

用毕后，先将载物盘上的东西拿走，松开锁紧螺丝将镜体放下并锁紧。取出目镜并换上防尘罩。将元件全部放回，注意不要与其它镜互换。用布把镜身擦干净，放入镜箱内，锁紧镜箱。

二、维护及保养工作

1、日常维护保养

（1）防潮

光学镜片就容易生霉、生雾。 机械零件受潮后，容易生锈。

显微镜箱内应放置1～2袋硅胶作干燥剂。

（2）防尘

光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成很大的污斑，影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同样很大。

注意保持显微镜的清洁。

（3）防腐蚀

显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。

（4）防热

避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。

因此，生物显微镜要放置在干燥阴凉、无尘、无腐蚀的地方。使用后，要立即擦拭干净，用防尘透气罩罩好或放在箱子内。当显微镜闲置时，用塑料罩盖好，并储放在干燥的地方防尘防霉。将物镜和目镜保存在干燥器之类的容器中，并防些干燥剂。

2、机械系统的维护保养

滑动部位：定期涂些中性润滑脂

油漆和塑料表面的清洁：顽固的污迹可以使用软性的清洁剂来清洗，建议使用硅布。

塑料部分：用软布蘸水就可以清洗了。

注意：不要使用有机溶剂（如酒精，乙醚，稀释剂等）。因为会腐蚀机械和油漆，造成损坏。

3、光学系统的维护保养

透镜的清洁

使用后用干净柔软的绸布轻轻擦拭目镜和物镜镜片。聚光镜和反光镜只要擦干净就可以了。

有较顽固的污迹，可用长纤维脱脂棉或干净的细棉布蘸少些二甲笨或镜头清洗液（3份酒精∶1份乙醚）擦拭，然后用干净细软的绸布擦干或用吹风球吹干。

注意：清洗液千万不能渗入到物镜镜片内部，否则会损坏物镜镜片。纯酒精和二甲苯容易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。

物镜和目镜的生霉生雾的处理办法

准备30%无水乙醇+70%乙醚，将不同镜头单独分开放置干燥剂器皿中，最好用棉花棒，纱布，柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭油镜当时就要清洗。

特别是100X的油镜，处理不当的话，前片容易浸油或开胶。

目镜可以自己拆下来清洗，16X目镜注意别装反了，前片凹面在上。

物镜不要随便拆下。

注意：擦洗镜头时，不能过用力，以防止损伤镀膜层。一般2个月最好能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以免弄错了搭配。

4、定期检查

为了保持性能的稳定，建议做定期的检查，保养。

综上所述，对于生物显微镜的维护保养，主要做到防尘、防潮、防热、防腐蚀。用后及时清洗擦拭干净，并定期在有关部位加注中性润滑油脂。对于一些结构复杂，装配精密的零部件，如果没有一定的专业知识，一定的技能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损坏零部件。