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细胞要做基因沉默相关实验,培养基可以加双抗吗

互联网

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华之风问:

请教园里战友,本人拟用siRNA转染做平滑肌细胞,观察基因沉默后效果的,但是我们实验室环境不太好,细胞培养容易污染,想加双抗,但不知道加双抗对基因转染沉默有无影响,谢谢!

丁香园网友hainblue认为:

有影响的,以前用脂质体转染的时候,说明书上说的是转染时不要用含有抗生素的培养基。他的解释是可能引起细胞死亡。具体怎么样就不知道了,比较试剂很贵,没钱作者方面的尝试。

丁香园网友laugh认为:

大多数不可以,因为增加了细胞通透性,抗生素的进入会增加细胞的死亡,但Qiagen的hyperfect系列可以,具体原理不知道,不过价格比较昂贵,当时因为细胞比较珍贵,就用了,效果不错,就是心痛银子。

丁香园网友wlnju认为:

一般的说,在实验操作之前,如果你的细胞里没有细菌污染的话,一般4~6个小时很难突然长出菌来,比如做mtt实验,mtt完全可以在普通环境里加入细胞培养上清。做转染时,在转染试剂和转染介质(我们用OPI-MEM)里,不需要添加抗生素,等转染结束后,换为普通培养基时,再加入适量的抗生素,因为血清会去除转染试剂的影响,所以这时候加抗生素对细胞没有多大影响。我是这么做的,没问题。放心吧。

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