脂类染色法

脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37℃-60℃）对组织切片染色效果是有好处的。

脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。

一、苏丹Ⅲ（Sudan Ⅲ）染色法：

操作方法：

（1） 固定于10%甲醛的组织。

（2） 水洗后采用冰冻或石蜡切片。

（3） 经蒸馏水后，浸染于Harris苏木素 或明矾苏木素中淡染1-2分钟。

（4） 自来水冲洗。

（5） 水洗后，移入70%酒精5秒钟。

（6） 投入苏丹Ⅲ染液中约30分钟或更长时间，置于56℃温箱中。

（7） 在70%酒精中洗涤5-10秒钟。

（8） 洗于蒸馏水中，然后将切片移于载玻片上。

（9） 切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。

（10） 甘油明胶封固。

结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。

试剂配制：

1、苏丹Ⅲ染液配法：将0.15克苏丹Ⅲ溶解于100ml70%酒精或纯丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。

注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。

2、甘油明胶配制：

明胶 40g

蒸馏水 210ml

甘油 250ml

石碳酸结晶 5ml

先将明胶浸入蒸馏水中2小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热15分钟，摇搅直至混合液均匀为止。