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DYCP-I琼脂糖水平电泳槽使用说明书

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DYCP-I琼脂糖水平槽是用来对少量核酸样品进行快速琼脂糖电泳的装置。制胶可在倒胶槽中完成。配备的多用途倒胶槽可以倒制6×6cm的小胶,也可以倒制12×6cm的宽胶,或6×12cm的长胶,还可以倒制12×12cm的大胶。本电泳槽还配有8种不同齿数和厚度的梳子供选择,包括大数量样品梳(25齿)、标准梳和各种制备梳。倒制好的各种大小的琼脂糖凝胶均可以放入水平电泳槽的平台上进行电泳。

开启包装

小心打开包装材料并认真核对装箱内容是否与装箱单相符。如果缺失任何配件,请立即通过电话或电子邮件与我公司联系,以便及时补寄。如果电泳槽主体部分在运输过程中损坏,可将损坏部分或整体退还我公司,以便及时调换。

技术指标

电泳槽承载凝胶的最大面积  12×12cm
  制胶托盘种类      6×6cm (小托盘)
              12×6cm(宽托盘)
              6×12cm (长托盘)
              12×12cm(大托盘)
  最大电压负荷      500V
  容纳缓冲液总体积    400ml
  外形尺寸(L×W×H)  26×17×7cm
  重量          120g

操作指南

制胶

可以根据具体需要制作小胶、宽胶、长胶、或大胶。现分别介绍四种不同规格凝胶的制作方法。

1、小胶(6×6cm):
每块倒胶槽可以倒制两块小胶。首先将两个透明小托盘平行放入倒胶槽内,然后将合适梳子的具2组梳齿的一面插入到倒胶槽的定位槽中。倒入加热过的琼脂糖胶液。

2、宽胶(12×6cm):
每块倒胶槽可以倒制1块宽胶。首先将透明宽托盘平行放入倒胶槽内,然后将合适梳子插入到倒胶槽的定位槽中。倒入加热过的琼脂糖胶液。

3、长胶(6×12cm):
每块倒胶槽可以倒制1块长胶。首先将透明长托盘平行放入倒胶槽内,然后将合适梳子的具2组齿的一面插入到倒胶槽的定位槽中。倒入加热过的琼脂糖胶液。

4、大胶(12×12cm):
必须采用不12×12cm的大倒胶槽基大托盘。制胶方法同制宽胶相似,但梳子可插1排或2排(注意:倒胶时,注意保持倒胶槽水平位置)。

电泳

1、轻轻拔掉梳子,注意先拔一侧。垂直拔出会使胶孔产生真空,导致部分凝胶被带出。将托盘从倒胶槽中取出,移入电泳槽。

2、在两水槽中加入电泳缓冲液,使凝胶全部被浸没,水位应略为高出胶面。


3、在梳井内加样,注意避免引入气泡。

4、盖好上盖,接通电泳仪。电压的高低可根据凝胶的长短决定,长胶需较高的电压。另外,采用高电压所需电泳时间较短,但产热高,分辨率较低,适合筛选样品或检查样品纯度。反这,低电压产热少,分辨率高,但费时。

附录

DNA迁移率

琼脂糖浓度与各种待分片段的关系如下表所示。其它影响分离结果的因素包括:电压、温度、分子构象、以及是否含有溴化乙锭。
  琼脂糖(%)        对线状DNA片段(kb)的有效分离范围
  0.5               1.0      30
  0.7               0.8       12
  1.0               0.5        10
  1.2               0.4        7
  1.5               0.2        3

电泳缓冲液

10X Tris-acetate-EDTA(TAE)母液
  (0.4m Tris,0.2m acetic acid,10mM EDTA,pH8.4,1000ml)
  Tris碱                           0.40M          48.4g
  乙酸(85%)                     0.20M          11.4ml
  EDTA溶液(0.5M,pH8.0)  0.01M        20.0ml
  去离子水                 加至1000ml
  搅拌至溶解。不要调母液的pH值。每次使用前,加水稀释10倍后的工作液含有40mM Tris,20mM乙酸和1mM EDTA。

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