血细胞比容测定
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(一)检测原理
血细胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。
1、离心法:包括温氏法(Wintrobe法)、微量法:是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。
2、血液分析仪法:原理是当细胞通过计数小孔时,形成相应大小的脉冲,脉冲的多少即为细胞数量,脉冲高度为细胞体积,通过红细胞平均体积(MCV)和红细胞计数(RBC)即求得血细胞比容,Hct=MCV×RBC.
(二)方法学评价
1、手工法:有折射计法、粘度法、比密测定法、离心法和放射性核素法。温氏法:采用中速离心,不能完全排除红细胞间残留血浆,测定结果偏高,已属淘汰。微量法:采用高速离心,细胞间残留血浆比温氏法少(约2%),且样本用量小、操作简便、残留血浆1%~3%.
2、血液分析仪法:仪器法CV为1%,手工法CV为2%,仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压异常时会出现误差。
(三)质量控制
1、手工法:抗凝剂量不准确、混匀不充分、离心速度不够会产生误差。红细胞形态异常(如小红细胞、大红细胞、椭圆形红细胞、镰形红细胞)或红细胞增多症可使血浆残留量增加6%.当红细胞增多时,Hct明显增高,血浆残留也会增加。
2、血液分析仪法:要注意Hct是否与RBC、MCV相关。
(四)参考值
Wintrobe法:男性0.40~0.54;女性0.37~0.47.
微量法:男性0.47±0.04;女性0.42±0.05.
(五)临床意义
1、增高:见于各种原因所致血液浓缩,如大量呕吐、大手术后、腹泻、失血、大面积烧伤、真性红细胞增多症(可达0.80L/L)、继发性红细胞增多症等。
2、减低:见于各种贫血,但不同类型的贫血,Hct减少程度与RBC计数值不完全一致。
3、输液评估:用于评估血浆容量有无增减或浓缩稀释程度,有助于控制补液量和了解体液平衡情况,是临床输血、输液治疗疗效观察的指标。
4、计算平均值:作为红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度计算的基础数据。也是影响全血粘度的决定因素之一。
(六)操作方法和注意事项
1、温氏法:取EDTA-K2或肝素钠抗凝静脉血2ml,加入温氏管中,用水平离心机以2264g(即有效半径22.5cm,3000r/min),离心30分钟,离心后血液分为5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层(紫黑红色)、带氧红细胞层(鲜红色)。读取还原红细胞层柱高的毫米数,乘以0.01,即为每升血液中红细胞体积的升数。
2、微量法:取抗凝全血或末梢血,充入一次性毛细玻管(管长75mm,内径约0.8~1.0mm,壁厚0.20~0.25mm,每支含肝素2U)的2/3(50mm)处,封口后,用水平式毛细管Hct离心机以12000r/min(相对离心力RCF≥10000g),离心5min,用专用读数板或刻度尺,读取还原红细胞层和全层长度,计算Hct值。
3、注意事项:橡皮泥封管口底面应平整,以深入毛细血管内2mm左右为宜。应做双份试验,结果之差应<0.01