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请问细菌浓度用什么方法测定比较好,如何测定?

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dxy_qvx9ayf6

可以用分光光度计测定吗,OD值为多少时浓度为10的8次方,求大佬帮忙!谢谢

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5 个回答

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bamboopiggy

有帮助

如果你是要数菌的量的话,建议用细胞计数板来计数,OD值只是一个相对值,在0.6-0.8时,菌的状态最好。

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天一湖医者

有帮助

常用的菌体浓度的测定方法(细菌计数方法)主要有以下几种:

1. 直接计数法

这是一种非常简单的检测方法,我们可以利用计数板或计数仪直接得出细菌数目。

1.1细菌计数板

首先制备细菌悬液,取一定体积的样品细菌悬液置于细菌计数板的计数池内,用显微镜观察计数。根据计数室刻度内的细菌数,计算样品中的含菌数。

特点:所需设备简单,测定结果较准确,可迅速得到结果,而且在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征。不能区分是否为细菌,不能区分活细菌和死细菌。单位:个/mL

计算方法:

(1)25×16的计数板:每毫升细菌数量=(100小格内的细胞数/100)×400×1000×稀释倍数

(2)16×25的计数板:

每毫升细菌数量=(80小格内的细胞数/80)×400×1000×稀释倍数

1.2 电子计数器计数法

电子计数器也属于直接计数法,其工作原理类似于血细胞分析仪,测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细菌,当一个细菌通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。计数单位:个/mL

特点:该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。

2. 活菌计数法

常用的有平板菌落计数法(cfu法),其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。取一定容量的细菌悬液,制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每mL原始样品中所含活细菌的总数。

特点:此法灵敏度高,是临床微生物检验工作中最常用的活菌计数法。前两种方法会将活与死的细菌全部算入,但是此方法只计算活的细菌。

计数单位:cfu/mL(cfu是菌落形成单位,是指由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,是计算细菌或霉菌数量的单位。cfu/mL指的是每毫升样品中含有的细菌菌落总数。菌落形成单位的计数方式与前两种计数方式不同,前两种方法会将活与死的细菌全部算入,但是该方法计算活的细菌。

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balalaLy

有帮助

用分光光度计,测OD值,然后按照1OD=0.undefined10^9CFU换算,并且要注意测OD时菌液的浓度不能太高,测出来的值在0.3-0.8之间是比较合适的

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未来9

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菌体浓度是指单位体积培养液中菌体的含量。 常用的菌体浓度的测定方法(细菌计数方法)主要有以下几种:

1. 直接计数法 这是一种非常简单的检测方法,我们可以利用计数板或计数仪直接得出 细菌数目。

2. 活菌计数法 此法灵敏度高,是临床微生物检验工作中最常用的活菌计数法。

3. 比浊法 比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮 物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。

4. 测定重量法 此法分为是干重法和湿重法。此法适于菌体浓度较高的样品,是测定丝状真菌生长量的常用方 法。

5、测定细胞总氮量或总碳量氮、碳是细胞的主要成分,含量较稳定,测定氮、碳的含量可以推知细 胞的质量。 特点:此法适于细胞浓度较高的样品。

6、颜色改变单位法 ccu是颜色改变单位,以微生物在培养基中的代谢活力为指标,根据培 养基颜色的改变来计数微生物数量的单位。这种方法通常用于很小,用一般的比浊法无法计数的微生物,比 如支原体等,因为支原体的液体培养物是完全透明的,呈现为清亮透明 红色,因此无法用比浊法来计数;而由于支原体固体培养很困难,用 cfu法也不容易计数,所以需要用特殊的计数方法,即CCU法。

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汤姆卜丽波

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这个需要你自己去测定一个大概得线性关系,就是摇菌然后测OD,铺板计数,隔一个小时测一次,铺一次,我们之前就这样测的,比较麻烦,不过大概OD1浓度10的9次方

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