植物呼吸速率的测定

呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一，植物呼吸速率的大小因植物类型、组织种类、生育期的差异而不同，也受着外界环境的影响。呼吸速率高的组织一般新陈代谢旺盛，呼吸速率低则说明代谢活动弱。

因此，呼吸速率的测定在植物生理研究及农业生产 实践等方面是必要的。其测定方法很多，如红外线 CO₂分析法、氧电极法、瓦氏呼吸仪法、呼吸瓶法等。本实验用广口瓶法测定植物的呼吸速率，并比较不同萌发阶段植物的呼吸速率。

在广口瓶中加入一定量 Ba(OH)₂ 溶液，植物材料呼吸放出的 CO₂ 可被瓶中的 Ba(OH)₂ 吸收，然后用草酸溶液滴定剩余的碱(反应如下)，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，可计算出释放的 CO₂ 量，用释放的 CO₂ 量来表示呼吸速率。

Ba(OH)₂+CO₂→BaCO_{3 ↓} +H₂O (20-1)

Ba(OH)₂(剩余）+ H₂C₂O₄ ↓+2H₂O (20-2)

材料：不同萌发阶段的小麦。

器材：广口瓶测呼吸装置1套，电子天平，酸式和碱式滴定管各1支，滴定管架1套。

试剂：

1/44 mol - L^-1草酸溶液：准确称取重结晶H₂C₂O₄ - 2H₂O 2.8651 g 溶于蒸儲水中，定容至1000 mL，每毫升相当于1mg CO₂；

0.05 mol - Ba(OH)₂ 溶液：Ba(OH)₂ 8. 6 g 或 Ba(OH)₂ - 8H₂O 15.78 g 溶于1000 mL蒸馅水中，如有浑浊，待溶液澄清后使用；

酚猷指示剂：称取1 g酚猷溶于100 mL 95% 乙醇，贮于滴瓶中。

植物呼吸速率的测定的基本过程可分为如下几步：

1. 装配广口瓶测呼吸装置：取500 mL广口瓶1个，加 一个三孔橡皮塞。一孔插入装有碱石灰的干燥管.使其吸 收空气中的CO₂ , 保证在测定呼吸时进入呼吸瓶的空气中无CO₂；一孔插入温度计；另一孔直径约1 cm，供滴定用。平时用小橡皮塞塞紧。在瓶塞下面装一小钩，以便悬挂用尼龙窗纱制作的小筐，供装植物材料用。整个装置如图 20-1所示。

2. 空白滴定：拔出滴定孔上的小橡皮塞，用碱滴定管向垣物生理学宴验指导瓶内准确加入0.05 mol - L ¹ Ba(OH)₂ 溶液20 mL，再把滴定孔塞紧。充分摇动广口瓶3~ 5 min。待瓶内CO₂全部被吸收后，拔出小橡皮塞加入酚猷3滴，把酸滴定管插入孔中，用 1/44 mol - 草酸溶液进行空白滴定，至红色刚刚消失为止，记下草酸溶液用量（mL）,即为空白滴定值。

3. 样品滴定：倒岀废液，先用自来水，再用新煮沸（为驱赶水中CO₂）并冷却的蒸馏水洗净 广口瓶，重加20 mL Ba(OH)₂ 溶液于瓶内，取待测小麦种子100粒，同时称出重量，装入小筐中，打开橡皮塞，迅速挂于橡皮塞的小钩上，塞好塞子，开始记录时间。

经30 min,其间轻轻摇动数次,使溶液表面的BaCO，薄膜破碎，有利于CO₂的充分吸收。到预定时间后，轻轻打开瓶塞，迅速取岀小筐，立即重新塞紧。充分摇动2 min，使瓶中CO₂完全被吸收，拔出小橡皮塞，加入酚猷3滴，用草酸溶液滴定如前。记下草酸溶液用量，即为样品滴定值。

4. 按步骤3测定100粒萌发小麦种子消耗草酸溶液的量。

5 .计算呼吸速率：

呼吸速率的单位一般可采用mgCO₂ · g^-1FW · h^-1,式中滴定值以mL计,mgCO₂ ·mL^-1 草酸=1。

1. 加样操作时，应设法防止室内空气和口中呼出的气体进入瓶内。

2. 注意掌握滴定终点。