小篮子法（广口瓶法）测定植物的呼吸速率

一、原理

植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品的呼吸速率。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。

二、材料、设备仪器及试剂

（一）材料：发芽的小麦种子或其它萌发的种子。

（二）仪器设备：1.呼吸测定装置；2.天平；3.钟表；4.酸式及碱式滴定管；5.温度计

（三）试剂：1. 0.05mol/L 左右的Ba（OH）2：称取Ba（OH）2 8.6g溶于1000ml蒸馏水中；2. 1／44mol/L 草酸溶液：准确称取重结晶的H2C2O4.2H2O 2.8651g溶于蒸馏水中定容至1000ml，每ml相当于1mgCO2；3. 酚酞指示剂：1g酚酞溶于100ml 95％乙醇中，贮于滴瓶中。

三、实验步骤

1. 取500ml广口瓶一个，瓶口瓶用打有三孔的橡皮塞塞紧，一孔插一盛碱石灰的干燥管，使呼吸过程中能进入无CO2的空气，一孔插温度计，另一孔直径约1cm，供滴定用，平时用一小橡皮塞塞紧，瓶塞下面挂一铁丝纱小篮，以便装植物样品，整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。

2. 在瓶口准确加入约0.05mol/L 的Ba(OH)2溶液20ml，立即塞紧橡皮塞（不带小篮），充分摇动广口瓶2min，待瓶内CO2全部被吸收后，拔出小橡皮管塞，加入酚酞指示剂2滴，把滴定管插入孔中，用标准草酸溶液进行空白滴定，直到红色刚刚消失为止。

3. 倒出废液，用无CO2的蒸馏水（煮沸过的）洗净后，重加上述Ba（OH）2溶液20ml，同时称取植物样品5～10g，装入小篮子中，挂于橡皮塞下，塞紧瓶塞，开始记录时间，经过20～30min，其间轻轻摇动数次，使溶液表面的BaCO3薄膜破坏，有利于充分吸收CO2。然后用草酸滴定，方法如前。（注意：防止口中呼出的气体浸入瓶内！）

四、结果计算

呼吸速率（mgCO2/g(FW)/h）＝（A－B）×1/(W×t)

上式中，A：空白滴定用去的草酸量（ml）；B：样品滴定用去的草酸量（ml）；W：样品鲜重（g）；t：测定时间（h）。每毫升1／44mol/L 的草酸相当于1mgCO2。