异常血清蛋白电泳图谱的临床分析
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一、电泳技术的原理
混悬于溶液中的带电质点在外加电场作用下,向着与之带相异电荷的电极方向移动的现象叫做“电泳”。利用电泳现象来达到将多组分物质分离分析或分离制备的技术叫做电泳技术。为电泳技术提供外加电场的仪器称为电泳仪。
蛋白电泳支持介质的种类较多,如滤纸、醋酸纤维素膜、琼脂糖等。琼脂糖是一种链状多糖,具有胶化效能高,低浓度,高透明度,紫外-可见光区域无吸收,不吸附蛋白质,分辨率清晰,透明可直接扫描等优点。
蛋白质和氨基酸都是两性电解质,其分子中的羧基(—COOH)和氨基(—NH2)在溶液中均可解离。血清蛋白质的等电点均低于pH7.0,在pH8.6的缓冲液中带负电,向阳极移动,分子小且带电荷多者,则移动速度较快,反之亦然。根据在电场中移动速度之快慢则将血清蛋白分为Alb,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白及γ-球蛋白。
二、电泳图形的识别
电泳图形的五个区带,并不是都由单一组分构成,而是分别包括数个成分。
1. Alb和γ-球蛋白:主要成分分别为Alb和IgG。
2. α1-球蛋白:主要是α1抗胰蛋白酶和α1酸性糖蛋白。α1抗胰蛋白酶是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白。当肺部多形核白细胞的吞噬活跃时,溶酶体弹性蛋白酶释放。若α1抗胰蛋白酶缺乏,酶过度作用于肺泡壁的弹性纤维而导致肺气肿。α1酸性糖蛋白在急性时相反应时,与α1抗胰蛋白酶同时增高,在严重肝损害、肾病综合症时降低。
3. α2-球蛋白:主要为结合珠蛋白和α2-巨球蛋白。结合珠蛋白与血红蛋白结合成一稳定的复合物,以防止血红蛋白从肾小球排出,既贮存了铁,又保护肾小管免受游离血红蛋白损伤。
4. β-球蛋白:以β脂蛋白、转铁蛋白和血红素结合蛋白为主。还包括补体成分。
三、异常血清蛋白电泳图形
1. 正常血清电泳图形
通常从正极到负极为Alb,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白及γ-球蛋白五个区带。β包括β1和β2,β2主要是C3成分。AFP位于Alb和α1-球蛋白之间。若样品为血浆,则纤维蛋白原泳动在β和γ之间。
由于各实验室的条件不同,应建立相应的正常参考范围。影响因素包括采血部位、时间、季节等;个体间的差异;操作技术等。
2.急性炎症及应激型:当机体受到各种损伤或炎症刺激时的病理现象。
主要特征: Alb减少或正常,α1、α2-球蛋白增高,γ-球蛋白增高不明显,当炎症转为慢性时,可明显增加。
病理生理: Alb下降主要是由于蛋白分解亢进所致,α1和α2-球蛋白增加与急性时相反应蛋白α1糖蛋白增加有关,β区带减少是由于转铁蛋白分解代谢增加所致。新生儿由于结合珠蛋白合成功能不完全,当有炎症病灶时,α2区带无明显增高,而α1区带可明显增高。
3.肾病型:由于肾小球受损引起低蛋白血症,蛋白尿,高脂血症以及全身性水肿。
主要特征: Alb明显降低,α1-球蛋白轻度增加,α2-球蛋白明显增加,γ-球蛋白降低、正常或增高。小儿类脂样肾病时,γ-球蛋白可降低,有时可降低至零;成人肾病综合症时,γ-球蛋白通常增加,特别是狼疮性肾病。
病理生理: Alb降低是由于肾小球滤过增加所致。α1-球蛋白增加,主要是小分子量的α1糖蛋白增加,可能是为了补偿由于Alb降低引起的低渗透压,虽然α1糖蛋白也大量丢失于尿中,但体内合成量超过排泄量,故仍可增高。α2-球蛋白明显增加是由于α2-球蛋白和低密度脂蛋白相对增加所致。
β球蛋白降低主要是分子量小的转铁蛋白排泄于尿中所致。γ-球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及体内分解亢进所造成,而慢性肾炎、狼疮性肾炎等γ-球蛋白增加,可能是由于免疫刺激,使IgG增加所致。
4. 弥漫性肝损伤型
主要特征: Alb明显降低, α1-球蛋白在轻度时可略增加,但肝细胞破坏严重时,则α1、α2和β球蛋白通常均降低,在胆汁郁积性肝炎时,α2和β球蛋白可增高,γ-球蛋白轻度或中度增高。
病理生理: Alb虽合成减少,但其半衰期长,其浓度减少多出现于发病后十天,随病情恢复而至正常,若为慢性则逐渐减少,其减少程度与肝炎的严重程度相一致。α1-球蛋白在肝炎初期,作为急性期反应物质常增加,而肝损伤严重时则降低,在致命的肝功能衰竭时,α1-球蛋白可降低到很低水平。
α2-球蛋白的降低,可能是由于结合珠蛋白合成降低所致,但胆汁郁积性肝炎时,由于脂蛋白增加,可见到α2-球蛋白部位增高,当急性肝坏死时,α2-球蛋白则明显减少。β球蛋白在肝炎早期几乎无变化,当肝细胞损伤严重时合成减少。几乎所有肝脏疾病γ-球蛋白因合成亢进均增高,其增加的范围与疾病的严重程度相一致。
5. 肝硬化型
主要特征: Alb均有不同程度的降低,α1、α2和β球蛋白正常或降低,γ-G明显增高且宽度增加,可见β-γ桥。
病理生理: 肝细胞受损导致Alb明显降低,β-γ桥的出现与血清免疫球蛋白,特别是IgA、IgM、IgG同时增加有关,其中以IgA影响较大,当IgA和IgM泳动在β和γ之间,使β区带与γ区带融合而形成β-γ桥。
6. 原发性肝癌
主要特征: 在Alb与α1-球蛋白之间出现一小的区带,称为甲胎蛋白带。
病理生理; 肝癌时,血清中的甲胎蛋白浓度为正常人的数十乃至数万倍。
7.宽幅高γ-G血症型(多株免疫球蛋白增高症)
主要特征: γ-G的宽度明显增加,呈宽幅高峰。
病理生理: 多株浆细胞以大致相同的速度增殖,大量合成免疫球蛋白所致,呈多株性,若合并急性感染,则α1、α2明显增高。
8. M蛋白血症(单株免疫球蛋白异常症)
主要特征:M蛋白又叫异常免疫球蛋白,其区带宽度与Alb带大致相等或较其狭窄,常分布在α2至慢γ-G部位。
病理生理: M蛋白是由某一细胞株分泌大量结构相同、电泳迁移率一致的蛋白。多发性骨髓瘤及原发性巨球蛋白血症时,M蛋白以外的其他免疫球蛋白明显降低,其可能是由于M蛋白大量消耗氨基酸,致使其他免疫球蛋白相对合成不足,以及M蛋白代谢亢进,其他免疫球蛋白的分解代谢也随之增加,故而含量降低。
来源:E时代医探