注射用青霉素钠家兔热原实验法标准操作规程(SOP)

名称：注射用青霉素钠家兔热原实验法标准操作规程(SOP)

关键词：注射用青霉素钠 家兔热原实验法 标准操作规程

目的：通过家兔热原实验法对注射用青霉素钠进行热原检查

背景知识：略

原理：略

主体内容：

家兔热原实验法

（1）试验动物：家兔

①供试家兔应健康无伤、肛门正常、毛色光滑，体重1.7～3.0kg，雌雄皆可，雌者无孕，分笼饲养，预测体温前一周应用同一饮料，在此期间，体重应不减轻，精神、食欲、排泄不得有异常现象；

②检查供试品前3～7日应以下列试验用兔预测体温，进行挑选：新兔；上次试验升温达0.6℃休息两周以上的试验兔，三周未曾使用的试验兔。挑选试验的条件与检查供试品相同，仅不注射药液，测体温时，体温计插入肛门的深度各兔应相等，约6cm，每1小时测理体温1次，共测4次，体温均在38.0～39.6℃范围内，且最高最低体温的差数不超过0.4℃为符合规定，方可供试验用。每只家兔用于热原试验体温的次数不超过10次；

（2）试验前的准备工作：

①用具的洗涤与灭菌 a 洗涤：注射器、称量瓶用水冲洗后放入清洁液中浸泡，取出用水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗至少3次，注射针、称量勺、镊子用水冲冼后，在2%NaNCO 溶液中煮沸10-15分钟，再用不冲洗干净后用蒸馏水冲洗至少3次；b灭菌：将洗干净的注射器、注射针、称量瓶、镊子置于铝盒中，放于250℃加热30分钟，放冷密闭保存备用；

②供试品溶液的制备：a精密称取青霉素钠（钾）适量，加灭菌无热原注射用水溶解成每1ml含24mg的溶液；c制备好的供试液放入恒温水浴箱中38℃预热待检；

（3）操作方法：

①将预选合格的家兔装入固定器中，应防止骚动，30分钟后能开始第一次测温；

②测温时轻轻提取兔尾，将有润滑剂的肛门温度计缓缓插入肛门，至少2分钟后温度计读数、记录；

③间隔30～60分钟后，第二次测温，同一只家兔两次预测体温之差不得超过0.2℃方可作试验用，以再次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔体温应在38～39.6℃的范围内；

④将试验兔分组，初试3只，复试5只，组内各兔正常体温之差不得超过1℃；

⑤预测体温后15分钟内自兔耳静脉缓缓注入已制备的供试液，注射前用75%的酒精擦兔耳边缘，注射剂量为青霉素钠（钾）注射用每公斤体重0.5ml，氨苄西林钠、注射用氨苄西林钠每公斤体重1ml，注射后用手捏住针眼处，以助止血，每批供试品可用同一支注射器；

⑥注射完结后，每隔1小时测量体温1次，共测3次，取3次中最后体温减去平均体温，即为该兔体温的升高度数；

（4）结果判定：

①在初试3只家兔中，升温均在0.6℃以下，且3只升温总数在1.4℃以下，或在复试5 只兔中升温0.6℃或0.6℃以上的兔数不超过1只，且初复试合并的8只兔的升温总数不超过3.5℃时为符合热原检查规定；

②初试3只兔中，若有1只兔升温0.6℃或0.6℃以上或3只兔升温均低于0.6℃但升温总数达1.4℃或1.4℃以上时应另取5只兔复试；

③初试3只兔升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只或在复试5只升温0.6℃或0.6℃以上兔数超过1只，或在初、复试中合并8兔升温总数超过3.5℃时为不符合热原检查规定；

（5）注意事项：

①热原试验室内外均应保持安静，避免强烈的日光、灯光、噪音及其他刺激；

②试验室温度为17～28℃之间，试验过程中，室温变化不超过5℃；

③复试时宜取试验次数较少的家兔；

④试验过程中，家兔因肛门出血过多造成升温或降温超过规定时，可考虑重试；

⑤试验全过程中，不得随意更换肛门温度计。

主要参考文献：略