如何使菌株产蛋白酶的量提高？

问：我的一些菌株产蛋白酶，但是想具体分析就必须要高量纯化，这是个问题？如何提高产量？还有有人问我，既然每个菌株都会产生一系列的蛋白酶，那么什么样的才是可以达到商业利用价值的，难道随便一株菌只要分离纯化出蛋白酶就ok了吗？（比较simple的idea）谢谢各位！

答：有多种因素影响菌株蛋白酶的产量，包括：

1、不同碳源对产酶的影响以及不同氮源对产酶的影响

2、碳氮比对菌株的生长和产酶有直接关系：例如，较低的碳氮比（C/N）常有利于蛋白酶产量的提高，但是这种条件下，发酵后期培养基的pH往往会向碱侧偏移；反过来，又会阻遏蛋白酶的积累，因此选择并控制适宜的碳氮比也是提高酶产量的一个重要因素。

3、添加表面活性剂Tween80对菌株产酶的影响：低浓度的表面活性剂对某些细菌的生长有促进作用，许多表面活性剂还能提高酶的产量，特别是有利于菌胞外酶的产生，而且它们对菌体和酶没有太大的专一性。

通常用于提高酶产量的表面活性剂多是非离子型的，如Tween80、TritonX－100等。它们对微生物没有毒性，或者毒性极小，产酶促进效果也因菌体种类和酶而有所不同。

4、发酵温度对菌株产酶的影响发酵温度不仅能影响菌体的生长，也能影响酶的合成。低温不利于菌株生长产酶，随着温度的提高，菌株的产酶量大幅度提高，但是当温度超过33℃到达34℃时，菌体的生长最旺盛，菌株的产酶活力大幅度增加，到34℃达到高峰。

从酶动力学来看，温度升高，反应速度加大，生长代谢加快，生产期提前。但因酶本身很易因热而失去活性，温度越高，酶的失活也越快，表现在菌体易于衰老，发酵周期的缩短，影响产物的最终产量。

答：提高菌株蛋白酶产量，除了从培养基，培养条件入手来解决此类问题以外，还有一个就是：可以加入适量的此蛋白酶的底物作为诱导剂来刺激菌株以提高蛋白酶产量，培养产酶类菌普遍采用此法，让菌株觉得有活干，它才肯下功夫出力气干活。

楼主所说的菌株产一系列蛋白酶，具体那一个或者怎么样才能达到商业应用的目的，这一方面和酶活有关，还跟此酶的产量有很多的关系，如果产量不高，也很男应用在商业上，目前应用在商业上的酶主要是通过基因工程菌来生产的。

前段时间查过南极假丝酵母candida antarctica产lipase A和lipase B两种酶，而lipase B在手性药物的拆分上应用比较广，因此丹麦NOVOZYME公司将产lipase B基因让Aspergillus. A表达，产出现在上市的NOVE435（lipase B from Candida Antarcitca)，当然也有用pichia表达的。就是这样子。