蛔虫及寄生蠕虫卵的检查

蛔虫及寄生蠕虫卵的检查

　　一、目的

　　了解蛔虫的形态结构以及线形动物（假体腔动物）的一般特征；学习几种常见寄生蠕虫卵的检查方法。

　　二、内容

　　（一）观察蛔虫浸制标本的外部形态。

　　（二）解剖并观察蛔虫内部结构。

　　（三）显微镜下观察蛔虫横切玻片标本。

　　（四）寄生蠕虫卵的检查。

　　（五）线形动物重要代表示范。

　　三、实验材料和用具

　　人蛔虫或猪蛔虫、马蛔虫浸制及横切面玻片标本。事先准备的学生自己粪便样品。

　　放大镜、解剖镜、显微镜、蜡盘、尖头镊、解剖剪、解剖针、大头针、三角量杯（或称锥形量杯）、长吸管、筛子、玻璃漏斗、玻璃棒、载玻片、盖玻片、离心机、离心管、锥形瓶、烧杯、竹签、火柴棒或牙签、4％煤酚皂、试管及试管架等。

　　生理盐水、饱和盐水（37．5g Nacl或食盐，加热水100mL）或33％硫酸锌。

　　四、实验操作及观察

　　检查蠕虫卵时，盛粪便的容器应洁净，粪便要新鲜且量不宜太少；鉴别虫卵时，要与气泡、脂肪滴、孢子等杂物区别开来。

　　（一）蛔虫：

　　1．外形：前端圆，后端尖。雄虫后端向腹面弯曲，有两根交接刺，常由泄殖腔孔中伸出。雌虫较粗大，后端不弯曲，肛门开口于腹面近体末端；生殖孔开口于体前端腹面约1/3处。体表角质膜上有很多细横纹，前端中央有口，口的背侧有1个背唇，腹侧有2个腹唇，背唇上有2个、腹唇上各有1个乳突。腹面前端，离腹唇2mm处有1个排泄孔。

　　2．内部解剖：取雌、雄虫置蜡盘中，从身体背部略偏背中线处剪开。用镊子拉开两侧的体壁，以大头针将蛔虫钉在蜡盘上，略加水，便于观察。

　　（1）体线：背、腹面的正中分别有1条背线和腹线，两侧各有1条侧线。

　　（2）消化系统：由口、咽、肠、直肠及肛门组成的长扁形消化管。

　　（3）排泄系统：排泄管2条，分别位于侧线中。

　　（4）生殖系统：雌雄异体。

　　雄性：体中部近前端有一细长、弯曲的管状精巢，由较短的输精管与较粗大的管状储精囊相通。储精囊连接细直的射精管，其末端雄孔开口于泄殖腔中。

　　雌性：体中部近后端有2条细长、弯曲的管状卵巢，各通入输卵管，再通入较粗大的子宫。2条子宫汇合成管状的阴道，末端的生殖孔开口于腹面前端约1/3处。

　　3．横切面玻片标本的观察：

　　（1）角质膜：身体表面一层非细胞构造的膜。

　　（2）表皮层：位于角质膜内侧，细胞界限不分明，仅可见颗粒状的细胞核及纵行纤维。

　　（3）体线：4条，纵行，由表皮层向内增厚形成。

　　背线及腹线：细，在身体背面及腹面的正中，二者形状完全相同。背、腹线的内侧膨大呈圆形，内含背神经及腹神经。腹神经比背神经粗，可以此区分背、腹线。

　　侧线：位于体两侧。其内侧有一圆孔，即排泄管。

　　（4）肌肉层：较厚，被4条体线分隔成4个部分，每个部分由许多纵肌细胞组成。每个纵肌细胞分成以下两部分：

　　收缩部：位于基部，含横行细纤维，富有弹性，能收缩。

　　原生质部：位于端部，含原生质和细胞核。

　　（5）肠：为体腔中央一扁圆形的管道，由单层柱状上皮细胞组成。肠中间的空隙为肠腔。

　　（6）初生体腔：肠与体壁之间的空腔。

　　（7）卵巢、输卵管和子宫：在体腔中可见形似车轮的卵巢，中心称轴，周围有辐射状排列的卵原细胞。输卵管较粗，圆形，轴已消失。子宫更粗，圆形，有明显的空腔，内含卵。

　　（8）精巢、输精管和储精囊：在体腔中可见形似车轮的精巢，中心称轴，周围有辐射状排列的精原细胞。输精管较粗，圆形，含颗粒状精细胞，轴已消失。储精囊更粗，圆形，有明显的空腔，含条形精子。

　　（二）寄生蠕虫卵的检查：

　　1．常用检查方法：

　　（1）涂片法：在清洁的载玻片中央滴一滴生理盐水，用竹签或火柴棒挑取少量粪便（约芝麻大），置于载玻片上的生理盐水中，均匀涂布。加盖玻片后在低倍镜下检查，再换高倍镜证实。

　　（2）浮集法：利用虫卵比重小于饱和盐水而浮于液面上的原理，收集漂浮的液膜进行检查（此法不适于有盖的虫卵及未受精的蛔虫卵）。以竹签挑取蚕豆大的粪便一块（约重1g）置于试管中，先加少量饱和盐水（或33％硫酸锌溶液），用玻璃棒将粪便调匀，再边加饱和盐水边搅匀。

除去上浮的粗粪渣，加饱和盐水直至稍高出试管口而不外溢为止。立即在试管口上覆一干净的载玻片或盖玻片。在试管架上静置15～20min后，将载玻片或盖玻片取下，加上盖玻片或将盖玻片放在载玻片上，置显微镜下检查。

　　（3）离心沉淀浓集法：利用虫卵比重大于水的原理，通过离心沉淀使虫卵迅速沉集管底，吸取管底沉渣检查。以竹签取蚕豆大的粪便一块，置烧杯中加少量水调匀。经筛子、漏斗装入离心管中，加上清水后离心（1500r/min）3min。取出离心管，倾去上层液，再加水调匀，离心沉淀，反复几次直至上层液澄清为止。最后倾去上层液，吸取沉渣镜检。

　　（4）孵化法：先作离心沉淀，将沉渣倒入1000mL的锥形瓶中，加清水至瓶口，置于20～28℃的恒温箱中。箱内有照明设备，以利虫卵孵化。经12h后，开始观察；72h后取出，观察孵化效果。此法适用于血吸虫卵内的毛蚴孵化，不适用于钩虫卵内的钩蚴孵化。

　　2．常见寄生虫卵的鉴别：

　　（1）蛔虫卵：分受精卵与未受精卵2种，两者在形态上不同。

　　受精卵：短椭圆形，壳厚，外有一层凹凸不平的蛋白膜（有时脱落）；内含一个圆形的卵细胞，细胞两端与壳之间的空隙呈新月形。

　　未受精卵：较不规则，比受精卵狭长；壳与蛋白膜（有时脱落）较薄；内含反光性较强的卵黄颗粒，呈油滴状。

　　（2）蛲虫卵：无色透明，芒果形，一侧扁平，一侧隆起，壳厚，内含一幼虫。

　　（3）钩虫卵：椭圆形，无色透明，壳薄，两端钝圆。一般在新鲜粪便中虫卵含4～8个卵细胞。卵细胞和卵壳之间有较大而清楚的空隙。

　　（4）血吸虫卵：淡黄色，椭圆形，卵壳较薄，无盖，一侧有小刺，小刺常因虫卵位置不同或卵壳上附着污物而不易看见。成熟卵内含有1个毛蚴。

　　（5）华枝睾吸虫卵：为常见寄生蠕虫卵中最小的。黄褐色，形如芝麻或灯泡状，前端稍窄，有一小盖及肩峰，后端钝圆，有一逗点状突起。卵内含一毛蚴。

　　（6）猪绦虫卵：黄褐色，圆形。胚膜厚，具辐射状条纹，内含1个六钩蚴。在粪便中查见的虫卵，其卵壳多已脱落。

　　五、示范

　　（一）蛲虫（Enterobius vermicularis）：寄生于人的盲肠、阑尾、结肠与小肠附近。虫体白色，细线头状，雌虫较长，后端细尖；雄虫较短，尾部卷曲。妊娠雌虫多于夜间移行于肛门和会阴附近皮肤上产卵。

　　（二）十二指肠钩虫（Ancylostoma duodenale）：寄生于人的小肠内。虫体头部有一相当深的口囊，口囊腹面两侧有钩齿2对。雌虫较大，生殖孔在身体的后半部；雄虫较小，尾端有一盘形的交合伞。

　　（三）铁线虫（Gordius aquaticus）：成虫自由生活于土壤或淡水沟渠中，长可达1m。雄虫尾端叉状；雌虫尾部尖锥状。卵产于水中，幼虫寄生于节肢动物的血腔内，将成熟时离开寄主，回到水中生活。

　　（四）猪巨吻棘虫（Macracan thorhynchus hirudinaceus）：常寄生于猪肠内。虫体乳白色或淡红色，呈长圆筒形，表面有横行的细皱纹。前端有一可伸缩的吻，上具5～6列倒钩。雄虫较小，尾部有钟状的交合伞；雌虫较大，尾部钝圆。

　　（五）示范：若本人粪便中未检到寄生蠕虫卵，则以他人粪便中检到的虫卵玻片作为示范。