Luciferase实验注意事项及常见问题分析

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为取得最佳测定效果，在用单管的荧光 测定仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，例如30秒内。

由于温度对酶 反应有影响，所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。

为保证荧光素酶检测试剂的稳定性，可以采取适当分装后避光保存的方法，以避免反复冻融和长时间暴露于室温。一般来说，如果不分装使用三次(期间冻融三次)，对测定结果无明显影响。

样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品最好使用相同的测定时间。

为避免由于质粒 转细胞时效率的差异而带来的误差，可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参，采用双荧光素酶报告基因检测 试剂盒进行检测;也可以同时转入β-半乳糖甘酶报告基因质粒作为内参，然后采用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒进行检测。

采用荧光素酶报告基因检测试剂盒中的报告基因 细胞 裂解液裂解获得的样品，可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因 检测试剂盒中的测定。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

标签: 哺乳动物转录调控 Luciferase 实验注意事项

作者：广州赛诚生物