实验动物组织标本的制备

【标本制作方法】

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2 ）保温（37 ℃）的营养液中，并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。

⑴肠管标本的制备通常取十二指肠或回肠十二指肠的兴奋性和自动律性较高，呈现活跃的舒缩活动。回肠比较静息，其运动曲线的基线比较稳定。

所用标本通常取1.5 cm 左右一段.两端用线结扎,以便固定于浴槽中。如果要分别观察肠管纵行肌或环行肌的运动,可将肠管沿其长轴剖开,取一条肌片,两端扎线固定,即可记录其纵行肌的活动。若要观察环行肌的运动，则要将肠管纵行切开后，作S形交互剪开,两端扎线固定牵张即成。

⑵胆囊标本的制备如果用狗的胆囊，可截取4 mm 宽2 cm长的全层肌片。兔或豚鼠的胆囊较小，取材时常与胆管一起摘下。兔的胆囊可沿其长轴切开分成两半；豚鼠的则可以用整个胆囊或取其半个进行实验。

⑶胆管标本的制备通常取狗的胆总管，将相边的十二肠组织切除留下乳头及胆道未端的括约肌组织。

⑷胃肌条可按肌肉纤维的走形取材。

【注意事项】

⑴操作时动作要轻柔，冲洗标本时不宜采用高压，以免组织挛缩。

⑵实验所用的营养液应视不同组织而不同。兔的肠管宜用蒂罗德溶液，胃肌和胆囊片用克氏液较好。

二、离体气管标本制备

【标本制作方法】

取豚鼠1 只，体重400～600 g 雌雄不拘。击头致昏后立即从腹面正中切开颈部皮肤和皮下组织，细心分离出气管，自甲状软骨剪下全部气管，剪除气管周围的结缔组织放入盛有克—享氏营养液的平皿中。可制成不同类型的标本。

⒈离体气管片标本制备

⑴将取下的整条豚鼠气管，从气管的腹面（软骨环面）正中纵行切开管。

⑵接着在2～3 个软骨的间隙处模行切断。将切下的气管平分为5～6 段，将两片气管在其纵切口处用针缝合，使之相互连成一串，标本串两端扎线，即制成离体气管片标本，供实验用。

⒉离体的整条豚鼠气管切成宽度相近的12 个环，并将这12 个环相互缝合成一串，供实验用。
这种方法要缝合12 个环，操作比较麻烦，而且对支气管平滑肌收缩药或舒张药的反应幅度较小，约为气管片的1/3。

⒊气管连环标本制备

⑴将取下的整条豚鼠气管，从软骨环之间由前向后和由后向前进行交叉横切。横切时均不切断，保留一小段。整段气管从上到下约横切10～15 处。

⑵将气管的两端缝线，一端固定，另一端拉开，即成气管连环标本，供实验用。

⒋气管螺旋条标本制备

【注意事项】

气管条标本不可在空气中暴露过久，更不宜用力牵拉，以免影响平滑肌的机能状态。

【标本制作方法】

⑴取家兔一只，雌雄均可，体重2～3 kg。击头致昏，迅速开胸，取出胸主动脉，置于预先通有95 %O2和5 %CO2的混合气的克-享氏液的烧杯中，洗去血凝块。

⑵将主动脉移至盛有克-氏液的培养皿中，将血管细心套入细玻棒上，去除血管周围的结缔组织，然后剪成宽3 mm、长3 mm 的螺旋条。将血管螺旋条的两端用线结扎备用。

【注意事项】

⑴取胸主动脉时应迅速；除去血管周围结缔组织时要细心，切勿剪破血管。

⑵操作时勿用力牵拉刺激标本，以免损伤标本。

⑶制备螺旋条时，细玻棒插入主动脉内的动作要轻柔，小心勿损伤血管内皮。

⑷也可用大白鼠的胸主动脉条作为标本。

【标本制作方法】

⑴用颈椎脱臼法处死大白鼠，仰卧位固定。

⑵经腹正中线切开下腹部，用镊子轻轻将脂肪及大网膜拨向两侧，在膀胱和直肠之间可见到子宫，从宫颈处剪断，取出子宫，立即置于盛有洛克溶液的玻璃平皿中。

⑶轻柔剥离附着于子宫壁上的结缔组织和脂肪组织。将一侧子宫角的两端分别用线结扎备用。

【注意事项】

⑴选用断乳后即与雄鼠隔笼饲养的健康雌鼠，鼠龄为3 个月以内，体重150～250 g。用阴道涂片法选择动情期前的动物供实验用，也可在实验前1～2 日每日皮下注射二丙酸已烯雌酚0.1 mg/kg，人工造成动情期，以提高子宫的敏感性。

⑵手术操作过程中避免过度用力牵拉，以免损伤子宫组织。操作时间越短越好。