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如何让支原体滚远点

互联网

2007

据统计,大约三分之一的细胞培养物都感染了支原体!

这些小东西神不知鬼不觉,侵入你的细胞。支原体大小一般在0.3-0.5um之间,最突出的结构特征是没有细胞壁,对作用于细胞壁生物合成的抗生素不敏感。

研究表明,支原体能耗尽营养物,促进代谢积累,导致pH改变,对细胞造成多种影响,包括生长状况、生化特性、代谢、免疫、以及细胞存活等多方面的改变,继而干扰实验结果,或造成无法解释的差异。更加不幸的是拯救被感染的细胞几乎是不可能的。因此,就支原体污染而言,预防是第一要务。

下面介绍了一些简单的预防措施,也许对你的实验有用。

首先,细胞来源

支原体污染的最常见原因之一是引入的培养物已经被感染。一旦进入实验室,这些小东西会蔓延到每个角落,让你崩溃。

要避免这种情况,最简单的办法就是不从其他实验室要细胞,而从供应商或菌种保藏中心购买,这些细胞经过严格检测,确保不含有支原体。

如果购买有难度,或基于其他原因,不得不使用其他实验室的细胞,那么也要保持警惕,在单独的培养箱中隔离,同时进行支原体的检测。市场上有多家公司提供支原体检测试剂盒,你可自行选择。

其次,定期检测

即使实验室没有新来的细胞,支原体也可能通过操作人员传递到现有的培养物。

同时,支原体污染的另一条路线是通过你的细胞培养试剂。培养基、酶这些常用试剂,也有可能被支原体污染。

尽管无法完全避免人或试剂的污染,但常规检测也能避免情况恶化。支原体检测方法有很多种。直接培养方法虽然准确率高,但需要三到四周的时间。也可以选择支原体检测试剂盒,有基于酶活性的生物生化分析、PCR分析等。

其三,做好无菌操作

支原体污染的另一个主要源头是无菌操作不佳。尽管良好的操作可能是最简单的预防措施,但说起来容易,做起来难。每个人都会犯错,特别是在重复劳动时。因此,实验室应不定期开展培训和监督,以便让每个人都充分认识到支原体的破坏性。

许多实验室目前仍使用抗生素,但它会带来了耐药微生物的问题。相反,最好依赖自身的无菌操作来预防支原体,而只有在怀疑或确认感染的时候才使用抗生素。

最后,保藏细胞防万一

通过低温保存储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么最可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确保储备的细胞是不含支原体的。

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