日立835与8800氨基酸分析仪的应用与比较

1、835-50型与8800型的比较

1.1 分离柱

分离柱是氨基酸分析仪的心脏部位。两台仪器均分别有两根柱子，一为标准氨基酸分析柱，一为专做生理体液中氨基酸的分离柱。835的分离柱大而长，柱内的树脂粒径较8800粗，对氨基酸各组分的分离度不如8800高；8800的分离柱精细而易堵塞，对样品的前处理要求极高。835的样品溶液上机前只要用滤纸过滤即可，而8800的不仅要离心还要过0.45μm的进口膜才能上机。

1.2 自动进样器

835长期使用后，很多部件磨损常接触不良，自动进样器常失灵，易进灰尘而变质，造成堵针、堵管的现象。8800的自动器相对封闭，进样盘为3 ℃制冷状态，样杯有密封盖，不易造成上机前样溶液浓度的变化，这对裸露在外面的835的样品盘而言是个极大的改进。

1.3 反应柱与显色剂

835使用的是反应圈，长度为20m，内径为215mm；L-8800使用的是反应柱，长度为4cm，柱内径为416mm ，填满3μm的惰性宝石颗粒。

在反应圈中，样品带由于反应圈内壁的阻尼效应，在管子中心流动相的速度最快，样品容易扩散，引起重叠效应；L-8800采用最优化反应柱，样品带通过135 ℃的高温（反应圈的反温度为98 ℃）及填满惰性宝石颗粒的反应柱，使氨基酸的衍生反应更彻底，灵敏度更高，流动相移动平缓，流动均匀，无样品带加宽现象，从而保证样品在高灵敏度、高速分析过程中很好地分离。

故L-8800型检出限可达3pmo1Asp ，而835型检出限为30pmolAsp ，L-8800的灵敏度是835的10倍，满足微量氨基酸分析的要求。由于反应柱填满惰性颗粒，比较容易引起阻塞，在配制茚三酮衍生剂时一定要选择质量好的茚三酮试剂，配好后要用0.45μm的微孔过滤膜过滤，就可以避免阻塞现象。

两种机型的显色剂均是茚三酮，但配法与使用大不相同。835机型是先配制茚三酮混合好后放入4 ℃的冰箱中保存，但在冰箱外面的部分仍然会结晶析出，造成堵管、堵电磁阀和泵2的单向阀，影响泵2的压力，造成茚三酮流量的减少，甚至无法正常工作而停机，通管、阀时很麻烦，极大地浪费人力和物力。

8800的茚三酮衍生剂是分开配制，用时再自动混合，避免结晶析出，不用放在冰箱中保存。由于乙二醇甲醚的毒性大，用835时将其改为乙二醇，并用乙酸钠代替乙酸锂，而用8800是则不能，因为乙二醇的粘度比乙二醇甲醚的大得多，而乙酸钠与乙二醇、乙二醇甲醚的互溶性不好，二者混合后易析出堵泵2的滤头，造成压力升高而报警停机。

使用乙二醇甲醚，其量也要注意适当，如果用量超过配方的10ml ，也会造成茚三酮缓冲溶液的粘度过大而累积在泵2的滤头，由于这种现象有个累积的过程，严重时茚三酮的流量极不稳，导致做样时所出峰形及基线很差，往往认为是反应柱堵塞或分离柱受污染而拆下来反冲，次数多不仅损伤柱的接头，也浪费时间，需将泵2滤头拆下来加入丙酮放在超声波清洗仪中超声，再用去离子水清洗即可。

1.4 缓冲溶液

835的整台机的管路和柱子均比8800粗，因此835的缓冲溶液一般只需用滤纸过滤即可。而8800则不同，因其柱子的精细，所用缓冲溶液均需用0.45μm的进口膜过滤脱气，否则会堵塞分离柱，这是初用者最常遇到的问题。8800的缓冲溶液B1中多加了乙醇，是为了洗去样品中可能带来的有机杂质，达到保护分离柱的作用。

使用国产试剂配制8800的缓冲液时常会遇到两个问题。

Thr-Ser、Gly-Ala的分离度差的现象，可以从三个方面解决，一是在B1中多加30ml乙醇，不需改分析程序即可，但乙醇加多了对柱中的树脂不利，柱压将会很快升高，时间长了会损坏分离柱；二是改用进口试剂配B1，现将分析程序中的7.0和7.5改为7.5和7.6 即可；三是在每升B1中多加0.5g 柠檬酸钠（国产即可），此方法最好。

其次是B4以后的基线漂移大，而B3与B4的转换正好是在酪氨酸出峰处，形成一个小坎，对于含量低的酪氨酸和苯丙氨酸会造成较大的测试误差，经反复试验，解决的办法是将配B4的去离子水再次蒸馏，或将本底基线扣除即可。

1.5 数据处理器

835的数据处理为单板机，不仅不能保存数据与谱图，时间久了常失灵，经常输入一大堆数据，仪器却不认或只认一部分，即使不出故障，每次进标样时都要输浓度、改计算号，分析时间太长，使用者很辛苦，若打印机故障，则给工作带来很大的损失。

8800作了大的改进，采用先进的计算机处理技术，大大方便使用者，提高工作效率。不论有多少样品，只需处理好放在样品盘上即可，不用输浓度改因子等繁琐事情，谱图可随时打印，数据的重现性远比835的好得多，不存在积分误差的问题。

2、835 与8800 氨基酸分析仪的应用

日本的电器设计上较适合亚洲尤其是中国市场，氨基酸分析仪也不例外，寿命很长，使用简便易懂。因此835-50型氨基酸分析仪一进入中国就被广泛使用。

我国地大物博，资源丰富，尤其是氨基酸与生物资源，各种食品、药品、饲料、工业用品、生理体液等，很多都要测其中的氨基酸成分，样品的复杂性和特殊性，让人们不断提高对氨基酸分析的技术，也要求氨基酸分析更快捷准确和方便，对各种氨基酸组分的分离度和灵敏度要求更高。

835-50型落后的电脑技术和渐显粗糙的分离柱、反应柱的缺点以及频发的故障已跟不上时代的需求。L-8800应势而来，它精密的技术和先进的电及处理器给人们耳目一新，它的快捷和极好的分离度更能满足人们在分析方法上的精益求精的需求和当前科技发展的需要。

但也并非可以将835弃之不用，835尽管年岁已久，很多部件常出故障，但人们对此早已谙熟在心，经过不断的维修与保养，仍可使其发挥作用。835的缓冲溶液有6瓶和相应的6条管路，而一般的氨基酸分析只需5 种缓冲溶液。

由于牛磺酸的测定用835只需25min的程序，用时配好它所要的缓冲溶液放在B5 的瓶中，输程序时注意改号即可，无需更换缓冲液，使用起来更方便，峰形、分离度及重现性都很好，对大批量含牛磺酸的产品、饮料等样品分析非常实用。

对于一些高钙含量如珍珠粉、珍珠水解液等样品来说，这类样品如果进入8800的分离柱，会造成对柱子的安全损坏，因此这类样品就要用835来做。两台仪器各有分工，互不影响。

3、讨论

由于8800所用的缓冲液、茚三酮溶液配制后均需过0.45μm的进口膜，样品处理后上机前也要求离心过膜，B1、B2最好改用进口试剂配制，因此人们会认为8800成本高、娇气、不易维修。其实不然，835的分析时间、预热稳定时间大大长于8800，茚三酮及缓冲溶液的利用率不及8800的一半，因此8800的成本仍大大低于835。由于835使用的是单板机数据处理器，采用实时记录谱图，使用者必须随时监测、操作，造成人力资源成本的提高，远不如8800的方便快捷、高效。只要严格按说明书操作和维护，8800使用起来也会得心应手。