小鼠肠系膜微循环实验实验指导

中药药理学实验

小鼠肠系膜微循环实验

【目的】

1.学习动物微循环显微观察方法。

2.观察药物对小鼠肠系膜微循环障碍的影响。

【原理】借助微循环显微观察系统，直接观察微血管特别是毛细血管的数量和形态，血液特别是血细胞在血管内的流动状态，以及毛血管周围状态，了解用药前后肠系膜微循环的变化。

【器材】 显微镜或显微录像系统、冷光源、小鼠肠系膜观察台、恒温 水浴 、手术器材、注射器等。

【药品】 复方扶芳藤合剂（原液）不含糖醇提物、0.004%去甲肾上腺素（NA）、0.4%戊巴比妥钠溶液

【动物】 小白鼠

【方法】

1.选取禁食12h以上小鼠10只，体重20～22g，雌雄各半。

2.麻醉：0.4%戊巴比妥钠溶液0.2ml/10g体重，ip。

3.手术：腹部切开一小口→轻轻拉出一段回肠→平铺于特制的有机玻璃灌流小池上，内盛有37±1℃任台氏液，以保持活体标本的恒温、恒湿、恒pH和一定的离子浓度。

4.用显微镜放大100倍，选择肠系膜微血管（选用毛细血管与1mm横线相交点）进行观察。

(1) 在视野下局部滴注NA 0.1ml造成微循环障碍。

(2) 在视野下局部滴注受试药物0.1ml（对照组给予同体积的NS），观察药后血流速度的变化。

血流速度：

①线流：血流快，呈光滑的索状，毫无颗粒感。

②线粒流：血流快，呈光滑的索状，稍有颗粒感。

③粒线流：血较流快，连续成线，有明显颗粒感。

④粒流：血较流快，轴流，缘流混杂，如泥沙流。

⑤粒缓流：血流呈泥沙状，连续缓慢流动。

⑥粒摆流：血流呈泥沙状，前后摆动，仍能流动。

⑦停滞：血流停滞不动。

【结果 】 观察微血管开放时间（ min）的变化，结果填入表4。本实验对正常动物微循环血液流速无明显影响。

【注意 】

1、温度对肠系膜微循环影响较大，应保持活体肠系膜标本在37±1℃。

2、腹部切口以1.5～2cm为宜,切口过大肠管易涌出影响观察,切口过小寻找观察部位不便且影响循环。

3、本实验是观察对正常小鼠微循环的影响，可预先复制微循环障碍动物模型(Animal Models)，观察活血化瘀方药对微循环障碍的影响。

【思考题 】

1、常见的动物微循环观察部位有哪些？

2、活血化瘀方药对微循环的影响有何临床意义？