微循环观察

[实验目的]
　　学习用显微镜或图像分析系统观察蛙肠系膜微循环内各血管及血流状况，了解微循环各组成部分的结构和血流特点。观察某些药物对微循环的影响。
[实验原理]
　　微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环，是血液和组织液进行物质交换的重要场所。经典的微循环包括微动脉、后微动脉、毛细血管前括约肌、真毛细血管网、通血毛细血管、动-静吻合支和微静脉等部分。
由于蛙类的肠系膜组织很薄，易于透光，可以在显微镜下或利用图像分析系统直接观察其微循环血流状态、微血管的舒缩活动及不同因素对微循环的影响。
　　在显微镜下,小动脉、微动脉管壁厚，管腔内径小，血流速度快，血流方向是从主干流向分支，有轴流（血细胞在血管中央流动）现象；小静脉、微静脉管壁薄，管腔内径大，血流速度慢，无轴流现象，血流方向是从分支向主干汇合；而毛细血管管径最细，仅允许单个细胞依次通过。
[实验对象]
　　蛙或蟾蜍。
[实验药品]
　　任氏液，20%氨基甲酸乙酯溶液，1:10000（g/ml）去甲肾上腺素，1:10000（g/ml）组胺。
[ 仪器 与器械]
　　显微镜或计算机微循环血流（图像）分析系统，有孔蛙板，蛙类手术器械，蛙钉， 吸管 ，注射器（1～2 ml）。
[实验方法与步骤]
　　1.实验准备：取蛙或蟾蜍一只，称重。在尾骨两侧进行皮下淋巴囊注射20%氨基甲酸乙酯（3 mg ·g-1），约10~15 min进入麻醉状态。用大头针将蛙腹位（或背位）固定在蛙板上，在腹部侧方做一纵行切口，轻轻拉出一段小肠袢，将肠系膜展开，小心铺在有孔蛙板上，用数枚大头针将其固定（图7.5-1）。
　　图7.5-1 蛙肠系膜标本固定方法

2．实验项目：
　　（1）在低倍显微镜下，识别动脉、静脉、小动脉、小静脉和毛细血管(图7.5-2)，观察血管壁、血管口径、血细胞形态、血流方向和流速等有何特征？图像经摄像头进入计算机微循环血流(图像)分析系统,对微循环血流做进一步分析.
　　图7.5-2 蛙肠系膜微循环的观察
　　（2）用小镊子给予肠系膜轻微机械刺激，观察此时血管口径及血流有何变化？
　　（3）用一小片 滤纸 将肠系膜上的任氏液小心吸干，然后滴加几滴1:10000（g/ml）去甲肾上腺素于肠系膜上，观察血管口径和血流有何变化？出现变化后立即用任氏液冲洗。
　　（4）血流恢复正常后，滴加几滴1:10000（g/ml）组胺于肠系膜上，观察血管口径及血流变化。
[注意事项]
　　（1）手术操作要仔细，避免出血造成视野模糊。
　　（2）固定肠系膜不能拉的过紧，不能扭曲，以免影响血管内血液流动。
　　（3）实验中要经常滴加少许任氏液，防止标本干燥。
[实验结果]
　　根据实验的观察,对微循环血流情况加以描述，并加以分析。