药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用

【目的】

了解胆碱能神经递质乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）和局部炎症介质组胺（histamine）对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用，以及它们的受体拮抗剂阿托品（atropine）和扑尔敏（chlorpheniramine）的阻断作用。

【原理】

消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性．传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。

Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。

【预习要求】

1．预习相关理论 生理学教材中平滑肌的生理特性和药理学教材acetylcholine、histamine相关章节和本书的实验34。

2． 仪器 使用 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。

3．实验理论 实验动物知识参见第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法；检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。

4．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。

5．预测实验结果。

【材料】

豚鼠；麦氏浴槽，超级恒温器，张力换能器，生物信号采集处理系统；台氏溶液，10-2g/L acetylcholine chloride溶液，1g/L atropine sulfate溶液，10-2 g/L histamine phosphate溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液。

【方法】

1．实验装置准备和 仪器 参数设置

（1）离体肠管描记装置的准备，麦氏浴槽中加固定量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。通气管接95%O2＋5%CO2 混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。

（2）张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线接微机 生物 信号处理系统，仪器参数设置：

RM6240系统：点击“实验”菜单，“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。

2．标本准备

（1）取豚鼠一只，用木槌击其头部致昏死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约1~1.5cm），用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。

（2）取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上，调节肌张力至2~3g。

【观察项目】

1．待离体回肠稳定10~30分钟后，记录一段正常收缩曲线后，依次向麦氏浴槽中滴加下列药物。加入一种药液后，观察2~3分钟，并连续记录肠管收缩曲线，然后用台氏液连续冲洗二次，待基线恢复到用药前的水平，随后记录一段基线。再加入第二种药液。浴槽液体的容量应相等。

2．加入10-2 g/L ACh 0.2ml，观察并记录其收缩曲线，2~3分钟后换液。

3．重复以上Ach 剂量，待收缩达最高点时，加入1g/L atropine 0.2ml，观察并记录其收缩曲线。不换液，待曲线降至基线或基本稳定后，再加入相同浓度的ACh，观察并记录其收缩曲线。

4．加入10-2 g/L histamine 0.3ml，待作用明显时(1~2分钟)，迅速换液。使肠肌张力恢复正常。

5．加入10-3 g/L chlorpheniramine溶液0.2ml 5分钟后(不换液)，加入同量histamine，观察并记录其收缩曲线。

6．加入10g/L BaCl2 溶液1ml，观察其反应，当作用达最高点，肠段持续于痉挛收缩状态时，加入1g/L atropine溶液0.2ml(或更大剂量)，观察并记录其收缩曲线。

7．本实验也可参考本书实验34的内容（Carbachol pD2和atropine pA2计算）进行实验。

【实验报告要求】

1．题目。

2．署名 作者和合作者姓名及单位。

3．结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。

4．材料和方法 主要实验材料，标本制备方法，仪器装置连接和仪器参数，实验数据记录条件，观察指标，数据用`x±s表示，统计方法。

5．结果 列各项处理前后的收缩幅度原始数据表格，对数据进行统计和显著性检验，实验结果的文字性描述（包括统计学的差异性）。

6．讨论 对实验结果进行分析。讨论M和H1受体激动药以及拮抗药的作用和机理。

7．参考文献。