药物对离体肠肌的作用

药物对离体肠肌的作用

【目的】

了解胆碱能神经递质乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）和局部炎症介质组胺（histamine）对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用，以及它们的受体拮抗剂阿托品（atropine）和扑尔敏（chlorpheniramine）的阻断作用。

【原理】

消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性．传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。

Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。

【预习要求】

1．预习相关理论 生理学教材中平滑肌的生理特性和药理学教材acetylcholine、histamine相关章节和本书的实验34。

2． 仪器 使用 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。

3．实验理论 实验动物知识参见第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法；检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。

4．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。

5．预测实验结果。

【材料】

豚鼠；麦氏浴槽，超级恒温器，张力换能器，生物信号采集处理系统；台氏溶液，10 -2 g/L acetylcholine chloride溶液，1g/L atropine sulfate溶液，10 -2 g/L histamine phosphate溶液、10 -3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl 2 溶液。

【方法】

1．实验装置准备和 仪器 参数设置

（1）离体肠管描记装置的准备见图7-15-1，麦氏浴槽中加固定量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。通气管接95%O2＋5%CO2 混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。

（2）张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数设置：

① RM6240系统：点击“实验”菜单，“自定义实验项目”菜单中的“肠肌记录”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。

② PcLab和MedLab系统：点击“文件”菜单“打开配置”中的“肠肌记录”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：通道放大倍数200~500、直流耦合（下限频率DC）、采样间隔5ms。

2．标本准备

（1）取豚鼠一只，用木槌击其头部致昏死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（约1~1.5cm），用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。

（2）取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上，调节肌张力至2~3g

【模拟实验操作方法】

1．模拟实验窗口鼠标点击麦氏浴槽放水口连接胶管上的螺丝夹，可使麦氏浴槽内的台氏液流出，麦氏浴槽进水口连接胶管上的螺丝夹打开，正常台氏液流入放麦氏浴槽内，达到冲洗、换液功能。

2．离体肠肌上端用棉线与张力换能器相连，肠肌活动用仿真记录仪记录。

3．仿真二道记录仪第一道记录离体肠肌收缩曲线，第二道记录实验项目标记。记录仪面板设灵敏度、位移、纸速、停纸按钮，面板设数字显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、肠肌收缩力量、实验项目、实验时间。

4． 试剂 架上放置药品有1:10万acetylcholine choride、1:10万histamine phosphate、0.1%atropine sulfate、1:100万chlorpheniramine和1%BaCl 2 溶液。滴头可拖动，鼠标器左键点击某一药品或 试剂 瓶的滴头并拖动至麦氏浴槽上方释放，以达到加药的目的。记录仪上显示数据，标注实验内容。

【观察项目】

1．滴加acetylcholine(ACh)，观察并记录其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。

2．滴加ACh ，待收缩达稳定时，加入atropine ，观察反应。待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。

3．加入histamine 待作用明显时迅速换液，使肠肌恢复正常。

4．加入chlorpheniramine溶液后(不换液)，再加入histamine，观察其反应，并与3比较。

5．加入BaCl 2 溶液，观察其反应，当作用达稳定时，加入atropine溶液，记录反应结果。

【实验报告】

1．题目。

2．署名 作者和合作者姓名及单位。

3．结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。

4．材料和方法 主要实验材料，标本制备方法，仪器装置连接和仪器参数，实验数据记录条件，观察指标。

5．结果 列各项处理前后的收缩幅度原始数据表格，实验结果的文字性描述。

6．讨论 对实验结果进行分析。讨论M和H1受体激动药以及拮抗药的作用和机理。

7．参考文献。