细胞形态不好的原因分析
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1.细胞欺负生手,也就是消化、吹打操作还有有一定影响的。
2.细胞生长不好与培养基直接相关,培养基中影响最为严重的就是牛血清。
3.支原体污染也是重要原因。但是正如上面朋友讲的,支原体在普通光学显微镜下是读不到的。我曾经检测过支原体污染,用的是牛心浸出液,即:将牛心去结缔组织,剁碎,浸煮,过滤,然后加琼脂成半固体。将细胞培养液做穿刺接种,有支原体者,围绕穿刺管道,会长出云雾状菌落。
4.细菌污染:有个别情况,细菌生长非常缓慢,似乎不太使细胞培养液体混浊,这个情况我遇到过多次。
5.环境:细胞生长不好的时候,千万记住要观察培养箱的二氧化碳的含量和温度。尤其温度,一定要看温度计,而不是看他数字显示。二氧化碳的含量可以从你培养细胞的颜色上观察,如果细胞还很稀疏液体就很黄了,多是因为二氧化碳的含量过高。当然,要同时观察多瓶细胞,而不是一瓶。还有,消化液不合适也会影响。
6.还曾经遇到洗液配制不合适。