McAb的制备方法

1、体外培养 在细胞培养过程中杂交瘤细胞能产生和分泌McAb，但是一般产生的抗体量很少，约10～100μg/ml。

近年来发展了各种新型培养技术和装置，包括用无血清培养液作悬浮培养法，中空纤维培养系统，全自动气升式或深层培养罐以及微囊或粒珠培养系统等。为了大批量生产McAb，有的公司已建成体内外结合的牛淋巴液循环法，大大提高了抗体的生产量。

2、体内诱生法 在小鼠体内接种杂交瘤细胞，制备腹水或血清McAb。

(1)腹水型McAb的制备：选择适当的健康小鼠，先于小鼠腹腔注射0.3ml―0.5ml降植烷或石腊油，7～10d后于每只小鼠腹腔注射阳性克隆的杂交瘤细胞1～5×106 个。待小鼠腹部明显膨大到一定程度时，用9号针头抽取腹水或用16号针头放腹水，可反复收集数次。

腹水经3000rpm/min离心后，取上清分装，置-20℃保存备用。腹水出现快慢与注射细胞类型及小鼠的质量有关。注射细胞少，腹水出现慢，但抗体效价高；注射细胞过多，腹水出现快，但可出现血性腹水。

(2)血清型McAb的制备：可将对数生长期的杂交瘤细胞于小鼠背部皮下多点注射，待肿瘤达到一定大小后(10～20d)即可采血，血清中McAb的含量可达1～10mg/ml。