常见缓冲液最新配制方法
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磷酸盐缓冲液,Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液,也是PeproTech重组细胞因子和蛋白溶解所需的常用缓冲液。然而,这些缓冲液的配制比较麻烦,尤其当要获得特定pH值的缓冲液时,调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等,pH计是无法准确测量其pH值的。
那么,有没有简便的方法来配制特定浓度和pH值的上述缓冲液呢?
美国PeproTech公司为此精心设计开发出一个网上实用工具。只要将你所需配置的浓度,pH值,以及配制的体积在网站上相应的位置输入或选定,即可计算出配制该溶液所需各组分的重量或体积,然后称取相应重量或体积的组分即可配制出您所需的缓冲液。
该网上工具包括以下内容:
1) 配制磷酸盐缓冲液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2) 配制柠檬酸(盐)缓冲液
由Citric Acid(柠檬酸)和Trisodium Citrate(柠檬酸钠)混合而得。
3) 配制醋酸溶液
在水中加入一定体积的醋酸而得。
4) 配制Tris缓冲液
由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris碱)混合而得。
5) 重量与摩尔数转换工具
已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩尔数和分子数,以及在一定体积内摩尔浓度。相反,也可由一个蛋白的摩尔数推算出重量和分子数,以及由摩尔浓度推算出所含的蛋白质量。
附:这些缓冲液在溶解PeproTech公司重组细胞因子和蛋白中的应用举例
1) 磷酸盐缓冲液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。
2) 柠檬酸(盐)缓冲液
5mM柠檬酸钠(pH 8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM柠檬酸(pH 3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3) 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4) Tris缓冲液
5mM Tris(pH 7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH 8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。
关于PeproTech公司重组细胞因子和蛋白溶解的具体方法和注意事项请见:http://www.biomart.cn/experiment/430/488/490/492/31321.htm
PeproTech公司简介:
PeproTech Inc. 创立于1988年,始终致力于为生命科学研究开发重组蛋白及相关产品,如今已成为能提供多种高质量细胞因子和重组蛋白,相应的单克隆、多克隆和生物素标记抗体,以及ELISA试剂盒的世界领导者。PeproTech Inc.的产品涵盖免疫调节蛋白、白介素、集落刺激因子、生长因子、化学趋化因子、干扰素、脂联素、成纤维生长因子、转化生长因子、肿瘤坏死因子、神经营养素和防御素等诸多生命科学研究领域中重要的生物活性分子。
为跟踪当今科研发展、满足日益增长的需求,PeproTech Inc.研制出无动物成分的重组蛋白(animal-free recombinant proteins)。这些蛋白是利用专有的无动物成分生产设施,在严格的无动物成分条件下生产出来,因此痕量的动物源性污染引发潜在问题的可能性被降至最低,从而完全达到临床前研究和细胞治疗用标准。此外,PeproTech Inc.最新还开发出无动物成分的培养基添加物试剂盒(animal-free Media Supplement Kits)。这些试剂盒经改良设计,其中的无血清组分对多种哺乳动物细胞的生长有更好的维持能力。
PeproTech Inc.的产品自2000年进入中国市场以来,以其优良的品质和合理的价格迅速得到国内各重点研究和实验机构的认可和青睐。鉴于中国经济发展的良好态势和中国生物医药研发投入的巨额增长,PeproTech Inc.于2009年10月在中国苏州设立代表机构,意为中国的广大用户提供更好的支持和服务,并助中国的科研和产业开发一臂之力。
PeproTech China (派普泰克中国代表处) 是由美国PeproTech Inc.亚洲分公司在中国设立的外资常驻代表机构,负责对细胞因子及相关产品(包括抗体和ELISA试剂盒等)进行技术支持和市场推广。