【转帖】各款荧光定量PCR仪的性能比较

本人从事荧光定量PCR检测试剂的开发工作，用过市场上主流的多款荧光定量PCR仪，如ABI5700，ABI7700，ABI7000，ABI7300，ABI7500，MJ opticon，MJ opticon2，bio-rad ICycler，LightCycler1.5，roter-gene3000，line-gene等等。

这种仪器各有各的特点，但都存在不足之处。总的来说，ABI公司的荧光定量PCR仪产品比较多，成系列，但目前而言ABI5700和ABI7700不能实时在线地检测荧光，因而已经退出历史舞台，尤其是ABI7700，不但很贵，而且采用苹果机电脑，使用很不方便。

ABI7000目前也已经淘汰，我用的这台仪器老出问题，曲线极不光滑，但同样的体系在国内机line-gene上曲线非常好，在ABI7500上曲线也很光滑，所以，本人估计是ABI7000设计上有不足之处。

现在市场上的ABI7300就是ABI7000的简单升级版，硬件设计上几乎没有改变，只是换过几个性能更好的配件，软件有所升级。不过我个人认为ABI7300和7500的软件有美化曲线之嫌，因为我有一次在ABI7000上做的很不好的文件，在ABI7500上打开时，曲线竟然变光滑了，而在者之前，在ABI7000上曲线很曲析不平的。

另外我个人感觉ABI7900（ABI公司第二代产品）有些华而不实，价格应该是所有荧光定量PCR仪中最贵的，但性能指标还不如ABI7500（ABI公司第三代产品），硬件设计上也不如ABI7500合理。

总的来说，ABI公司在荧光定量领域上还是做出很多贡献的，其仪器在科研上还是可以用的，但由于硬件设计上的缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，并且占用了一个检测通道。

国内的试剂厂商都不加ROX染料，科研用户一般也不使用，所以其检测的准确性和重复性还是很难保证的，尤其浓度较低的模板进行检测时效果不佳，偏差会很大。

罗氏的LightCycler以运行速度快而著称，在国内市场占有率最高，但本人最初使用时老出问题，有时候阳性曲线做不出来，后来发现这跟其独特的毛细管设计有关系，因为毛细管很细，所以反应液在毛细管中的交换对流非常不畅，反应液在低温是蛋白会以结晶状态析出，没有充分混匀时就加入毛细管会影响反应的进行，热启动酶不会受影响。

所以本人在操作时都特意将反应液混合充分后再加入毛细管，这样实验就比较正常了。本人开始使用罗氏的仪器时最怕毛细管断裂，操作时特别担心，熟悉以后，规范使用随机赠送的操作配件，毛细管也就没断过。

而且最重要的是，罗氏的仪器稳定性非常好，灵敏度明显比其它仪器高，这也许跟毛细管和其检测元件有关系，检测重复性也非常好，所得定量结果可信度高。本人所使用的罗氏LightCycler1.5三四年了也没出现硬件的故障。

罗氏公司推出的LightCycler2.0在原有基础上检测通道增加到六个，软件功能也更加丰富。据说最新推出的LightCycler480是目前全球最先进的荧光定量PCR仪，突破了传统技术的瓶颈，推出了不具边缘效应的高通量荧光定量PCR仪。具体没有用过，听说使用非常灵活。

MJ的仪器总体上而言比较稳定，但检测灵敏度不高，功能单一，检测通道不多，运行时间太长。

伯乐的ICycler仪器也许是设计上的缺陷还是什么原因，同样的反应体系，在该仪器上进行实验时，阳性样本的扩增曲线荧光增量比较低，检测效果不好，所以在全国很少用户使用该仪器。

Line-gene仪器的使用比较方便，但返修率较高，不过厂家就在国内，售后服务非常及时。

roter-gene3000跟罗氏公司的LightCycler有很多相似之处，只是roter-gene在操作时比较麻烦，而且采用普遍反应管，光透性不好，影响了检测结果，这可以从其原始曲线上看出来，但该仪器的软件所表现的是对数曲线，把其原始曲线上的曲析不平掩盖了，其灵敏度不高。