合作专家 | 郭新容硕士
临床医学 中南大学
审核专家 | 姬杨丽敏博士
高分子化学与物理 中国科学院化学研究所
简介
筛选金属富集细菌的硫化氢实验是一种用于筛选能够通过产生硫化氢来富集金属离子的细菌的实验。该实验可分为定性实验和定量实验。
① 定性实验:通过观察产生硫化氢的细菌在含有金属离子的培养基上生长时形成的黑色沉淀或固体,从而判断该细菌是否具有金属离子富集能力。
② 定量实验:产生硫化氢的细菌在含有金属离子的液体培养基上生长时,可通过测量培养基中硫化氢的含量来评估该细菌对金属离子的富集能力。
原理
该实验基于细菌产生硫化氢的生理特性,利用硫化氢与金属离子形成沉淀的化学反应,通过观察沉淀或测量硫化氢含量的方式来筛选出具有金属离子富集能力的细菌。
用途
该实验可用于筛选具有金属离子富集能力的细菌,为生物浸出、生物修复等工业应用提供基础研究和实践支持。
材料与仪器
1. 含有目标金属离子的液体或固体培养基
2. 需要测试的细菌菌株
3. 10% 硫酸铵溶液
4. 1% 氯化镁 MgCI2 溶液
5. 0.5% 氢氧化钠 NaOH 溶液
6. 75% 乙醇
7. 过滤纸、活性炭滤纸
步骤
1. 准备含有目标金属离子的液体或固体培养基。
2. 取细菌菌株接种于含有目标金属离子的培养基中,培养至适当的生长期。
3. 取少量活菌进行稀释,接种于含有目标金属离子的培养基中,培养至适当的生长期。
4. 取一定量的硫酸铵溶液,加入少量的氯化镁溶液和氢氧化钠溶液,调节 pH 值至合适。
调节 pH 值的具体数值需要根据实验所使用的试剂和细菌菌株的特性来确定。
例如:硫酸还原菌一般生长于酸性条件下,pH 值在 6.5~7.5 之间。
5. 将过滤纸置于硫酸铵溶液中,待其吸收溶液并变成湿润状。
6. 将过滤纸取出,放置于培养皿中,接种细菌菌株。
7. 将培养皿密封,置于适当的温度和湿度条件下,培养一定时间。
8. 观察过滤纸上是否形成黑色沉淀或固体,判断细菌是否具有金属离子富集能力。
9. 如需定量测定硫化氢含量,可在培养基中加入活性炭滤纸,待培养结束后,取出滤纸,用乙醇洗涤,然后加入硫酸铵溶液中,用电化学法测定其中的硫化氢含量。
注意事项
1. 实验过程中需要注意安全,避免接触硫化氢等有害气体。
2. 实验中需选择适当的金属离子和培养基,以确保实验结果的可靠性。
3. 实验过程中需避免氧气的污染,以免影响硫化氢的产生和金属离子的沉淀反应。
4. 实验中需控制好细菌的生长时间和温度,避免影响实验结果。
常见问题
1. 金属离子沉淀不明显:可能是金属离子浓度过低,需提高金属离子浓度;或者是硫化氢生成量不足,需延长细菌生长时间或添加硫化氢供体。
2. 培养基出现不同颜色的沉淀:可能是培养基中含有其他化学物质,需更换纯净的培养基;或者是细菌株的生长条件不同,需进行分离和鉴定。
3. 实验过程中出现异味:可能是硫化氢泄漏,需停止实验并进行适当的气体处理和通风。
来源:丁香实验