合作专家 | 郭新容硕士
临床医学 中南大学
审核专家 | 聂壹峰博士
纳米生物医学 中国科学院大学
简介
小鼠切除伤口恢复模型已经大量用于伤口愈合以及皮肤再生。由于小鼠的皮肤是移动的,因此在伤口闭合过程中存在收缩。
在构建的小鼠切除伤口夹板模型中,夹板环会紧紧黏在伤口周边,防止局部皮肤皱缩,因此伤口通过肉芽形成和上皮组织自行修复功能再次愈合,此过程也会在人类身上发生。
原理
切除伤口夹板模型使用的夹板环紧紧地粘附于伤口周围的皮肤上,防止由皮肤收缩引起的伤口闭合,从而通过肉芽形成和再上皮化使得伤口愈合,类似的过程也可以在人类身上实现,因此可以反映人体伤口愈合。
夹板内边与伤口边缘完全匹配,因此夹板孔区域代表着原始伤口大小,可以不同时间点拍摄到伤口,并且伤口闭合的百分比易于计算。
该模型中皮肤收缩及伤口料造成的技术性变量得到了最小化,所以可以生成统一的伤口闭合数据用于模拟人类伤口愈合。
用途
伤口愈合,皮肤再生,干细胞和组织移植以及免疫排斥反应。
材料与仪器
① BALB/c 小鼠(7~8 周龄)
② 次氯酸钠
③ 乙醇
④ 无菌水
⑤ 无菌纱布
⑥ 戊巴比妥钠(50 mg·kg-1)
步骤
(1)使用直径为 15 mm 的圆形切割器从 0.5 mm 厚的硅胶片上切割,然后使用直径为 6 mm 的活检冲头在中心切割一个小孔,形成环形夹板。
(2)用清洁剂仔细清洗夹板,然后用水冲洗。
(3)将夹板在次氯酸钠(20 000 ppm)中孵育 30 min,用无菌水清洗,并在 70% 乙醇中孵育至少 30 min,用无菌纱布将组织培养罩中的夹板风干。
(4)腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉小鼠,小鼠麻醉后将小鼠背部和侧面的毛发脱去,置于实验桌子上,呈仰卧位固定四肢。
(5)用碘伏和酒精湿巾清理背部皮肤,小剪刀剪开皮肤。
(6)在每只动物的背侧打开 6 毫米的全层圆形伤口(延伸至肉囊),位置根据实验选择。
(7)用硅胶环将伤口支架打开,硅胶环用粘合剂固定在伤口周围,每个环有八个 6-0 尼龙缝合线(Ethicon)。
(8)敷料在麻醉下每隔一天更换一次。
(9)通过使用 2 mm 活检冲头切除每个伤口周围的 10 mm 组织环来获得特定形状的伤口,在第 3、7、10 和 14 d 进行伤口大小测量和愈合比例计算。
注意事项
1、因为啮齿类动物不同人类的伤口愈合特性,所以有着明显的局限性。啮齿动物因为皮肤可以移动,皮肤收缩占了伤口闭合的很大一部分; 而人类的皮肤与皮下组织相连,新组织的产生形成伤口愈合。
2、伤口周围皮肤的收缩也受动物的姿势和运动,以及伤口料的影响,因而会导致了伤口闭合过程相当大的差异。
3、需要一个在最小技术变量下稳定的伤口愈合模型,且实现数据的高重复性。
来源:丁香实验