【动物影像】小鼠活体光学成像

超声系统、麻醉机、小鼠等

一、检查设备

仪器主要包括小动物超声系统、麻醉机等，检查仪器设备，必须使其处于正常运转状态，以保证实验顺利进行。

二、动物麻醉

光学成像可选用注射麻醉药剂和气体麻醉，注射可用三漠乙醇、戊巴比妥钠进行腹腔注射。

气体麻醉可釆用异氟烷吸入性麻醉药剂，麻醉诱导和复苏均较快。大小鼠一般使用浓度为 2% 的异氟烷与氧气混合使用。

三、注射底物

如果进行生物发光成像，需在麻醉后注射荧光素底物。动物腹腔注射荧光素，最佳开始检测的时间是注射后 lOmino 荧光素的最适用量是 15Omg/kg ,即体重 20g 的小鼠需要 3mg 的荧光素。

四、摆放小动物

荧光成像中可将小动物麻醉后直接摆放至设备的动物平台上，注射荧光素小动物注射底物后 lOmin 摆放，将待检测部位朝向上方［电荷耦合器件图像传感器( chargecoupleddevice,CCD )方向］,一般采取仰卧位。

五、检査位置与 CCD 温度

关闭暗箱门，打开明场灯，以确定小动物位置是否在视野内，可在视野内并排摆放多只小动物，确定 CCD 温度降至 - 70°C。

六、设置釆集条件

根据实验要求选择相应的滤光片组，生物发光成像只需设置发射光滤光片和釆集时间,一般为 10〜20 min ,荧光成像则根据荧光物质种类选择相应激发光和发射光滤光片，釆集时间一般为 200〜800 ms。

七、图像处理

曝光结束后获得图像，进行明场图像和荧光图像融合，调整窗宽、窗位优化显示效果，并进行发光区域定量分析。