简介
通常我们把具有 C6-C3 C6 碳骨架结构的一类物质称为类黄酮 (flavonoid) 化合 物，包括黄酮类 (flavones )、黄酮醇类 (flavonols )、黄烷酮类 (flavanones)、喳耳酮类 (chai- cones)、花色素昔类 (anthocyanins) 等，这类化合物广泛分布于植物的各个器官中，与植物的 生长和发育都有关系，近年人们还发现它们也是对人类健康非常有益的物质。
原理
植物黄酮化合物含量的测定的基本原理是类黄酮化合物在植物中大都以糖昔的形式存在，所以在提取过程中应防止植物 自身的酸性引起糖昔水解，提取时可加入少许 CaCO3 以避免之。提取时可根据化合物的性 质来选择溶剂，醇类适用于糖昔类及含有多个羟基的化合物，如果化合物的甲基化程度高或 为非糖昔型，则用乙醍较合适。测定黄酮化合物含量可直接使用分光光度法，利用黄酮类化 合物结构上的酚羟基及其还原性特征进行显色，在特定波长下测定黄酮类化合物。常用的显 色试剂有 A1(NO3)3、A1CL 等金属盐,AF+可与黄酮类化合物分子中羟基反应生成有色金属 络合物。
材料与仪器
材料: 柑橘类水果、银杏叶片、荷叶等。
器材：分光光度计，电子天平，烘箱，水浴锅，索氏抽提器，分液漏斗。
试剂：
①70% 乙醇乙醍
②5% NaNO2 溶液
③10% A1(NO3)3 溶液
④4% NaOH 溶液
⑤CaCO3,100 昭・mL^芦丁溶液 (10 mg 芦丁用 70% 乙醇定容至 100 mL)。
步骤
植物黄酮化合物含量的测定的基本过程可分为如下几步：
1. 绘制标准曲线：将芦丁溶液用 70% 乙醇稀释成 0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50 昭・ mL"1，各吸取 1 mL 于试管中，加 70% 乙醇 1 mL, 加入 0. 3 mL 5% NaNO2 溶液,6 min 后加 入 0.3 mL 10% A1(NO3)3 溶液，6 min 后再加入 2 mL 4% NaOH 溶液使混合液澄清， 10 min 后于分光光度计波长 510 nm 处测定 OD 值。绘制质量浓度-OD 值标准曲线。
2. 黄酮的提取: 取银杏 (或其他植物) 叶子 1 g 置于索氏抽提器中，加入 70% 乙醇 100 mL 及少许 CaCO3，抽提 6〜8 h, 倒出提取液减压浓缩蒸去乙醇。浓缩液于分液漏斗中用相同体 积的乙醍洗 2〜3 次，以除去叶绿素及蜡纸等，然后用 70% 乙醇定容至 100 mL, 待测。另称 取叶子 10 g 于 105 笆烘箱中烘至恒重，以测定水分含量。
3 . 提取液中总黄酮的测定：吸取样品溶液 1 mL, 按上述同样的步骤和方法测得吸光度 值，从标准曲线查得样品中总黄酮 (以芦丁表示) 的含量 (Mg- mL-1)。
4 . 结果计算
干叶中总黄铜含量（座-g7）=vxp
式中:V-l g 干叶制得的提取液体积，mL；
p 一提取液中测得的总黄酮含量- mL~l。
注意事项
1. 不同植物的黄酮化合物差异较大，提取可选用不同方法。
2. 如果选取的显色试剂不同，测定波长需要重新扫描。
来源：丁香实验
