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家兔肠缺血-再灌注损伤法

相关实验:实验性缺血-再灌注损伤实验

最新修订时间:

简介

家是用来复制家兔实验性肠缺血-再灌注损伤模型的实验方法。兔肠缺血-再灌注损伤法

原理

家兔肠缺血-再灌注损伤法的基本原理是通过结扎家兔肠系膜上动脉阻断血供,而后解除结扎恢复血液灌流,观察家兔动脉血压、腹腔渗出情况、小肠形态学变化(淤血、点状出血、水肿等)。

用途

家兔肠缺血-再灌注损伤法可用于观察家兔实验性肠缺血-再灌注损伤时小肠的形态学变化。

材料与仪器

器材:

兔常规手术器械一套、兔手术台、生物信号采集分析系统

压力换能器、张力换能器、动脉导管、动脉夹、烧杯、注射器、止血纱布、婴儿秤。

试剂:

①3% 戊巴比妥钠(1 mL/kg);
②肝素(125 U/mL);
③生理盐水。

步骤

家兔肠缺血-再灌注损伤法的基本过程可分为如下几步:

A. 家兔称重后耳缘静脉注射3% 戊巴比妥钠(1~1.5 mL/kg)麻醉,仰卧位固定于兔手术台上。剪去颈部被毛,行颈前正中切口(切口范围:甲状软骨下缘→胸骨上切迹),分离一侧颈总动脉,长2~3 cm,穿线备用。分离气管做气管插管术,并将插管的一侧接呼吸描记装置,描记呼吸。

B. 在剑突下方1.5 cm处向下沿正中线做长约5 cm的腹正中切口,打开腹腔,用生理盐水纱布将内脏轻轻左移,暴露出脊柱及腹膜后组织,找到齐右肾门对侧、垂直从腹主动脉分出的肠系膜上动脉,并将其分离出来,穿双线备用(图9-2)。

C. 朝近心端方向行颈总动脉插管,并与压力换能器相连,以记录血压(图9-3)。


D. 记录各生理指征。在观察完各项指标正常值后,沿动脉行走方向在肠系膜上动脉上面放置一根长2~3 cm的橡胶管,用棉线将其与肠系膜上动脉一同结扎,结扎要牢固,完全阻断肠系膜上动脉的血流。记录结扎后0、5、15、30和60 min时的各项指标。

E. 缺血-再灌注组家兔在缺血60 min时用剪刀剪断结扎橡胶管上的棉线,移开橡胶管,用手在肠系膜上动脉远心端触摸,感觉有动脉搏动时,说明小肠血流恢复,也可观察小肠颜色变化来判断小肠血流恢复情况。记录松开结扎后0、5、15、30和60 min时的各项指标。持续缺血组则不松开,继续对肠系膜上动脉血流的阻断作用。

注意:假手术组,仅在肠系膜上动脉下穿线;持续缺血组除不松解结扎线外,其余均与缺血-再灌注组相同。

注意事项

(1)移动内脏时动作要轻柔,不要人为过度牵拉肠管,以免引起低血压而影响实验结果。
(2)分离肠系膜上动脉时要小心细致,不要使用锐利器械,以免损伤大血管,造成大出血。
(3)每次观察完肠壁颜色、水肿、出血点和肠腔渗出情况后,要用生理盐水湿润的纱布覆盖小肠,以防肠壁干燥而影响各项指标的观察。

来源:丁香实验

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