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谷物中淀粉含量的测定

相关实验:谷物中淀粉含量的测定

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简介

淀粉(starch)是植物的主要贮藏物质,大部分贮存于种子、块根和块茎中。淀粉 不仅是重要的营养物质,并且在工业上的应用也很广泛。测定谷物中淀粉的含量对于鉴定农 产品的品质和改进农业生产技术有很大的意义。

原理

谷物中淀粉含量的测定的基本原理是淀粉是由葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖, 然后在 浓硫酸的作用下,使单糖脱水生成糠醛类化合物,利用蔥酮试剂与糠醛化合物的显色反应,即 可进行比色测定。

材料与仪器

材料:面粉或其他风干粉碎的样品

器材:植物样品粉碎机,离心机,天平,分光光度计,恒温水浴锅,分样筛(100 目),漏斗, 离心管等。

试剂:

①浓 H2SO4(相对密度 1.84)

②蔥酮试剂(同实验五十二)

③80% 乙醇

④4.6 mol -1 HClO4 溶液和 9. 2 mol - L-1 HClO4 溶液。

步骤

谷物中淀粉含量的测定的基本过程可分为如下几步:
1. 标准曲线制作:取7支大试管,按表52-1添加试剂,立即摇匀,盖上盖子,在沸水浴中 煮沸10 min, 取出冷却至室温,用0管调零,在625 nm波长下比色。以标准葡萄糖含量作横 坐标,以吸光度值作纵坐标,绘制标准曲线。
表52-1标准曲线制作加样表
试剂 试管编号
0 1 2 3 4 5 6
标准葡萄糖溶液/mL 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
蒸榴水/mL 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0
蔗糖浓度/(ptg・mL'1 ) 0 10 20 40 60 80 100
蔥酮试剂/mL 5 5 5 5 5 5 5
2 . 样品的提取:称取 50〜100 mg 粉碎过 100 目筛的烘干样品,置于 15 mL 刻度试管中, 加入 6〜7 mL 80% 乙醇,在 80°C 水浴中提取 30 min, 取出离心(3 000 r • min 1)5 min, 收集 上清液。重复提取两次(各 10 min)并同样离心,收集 3 次上清液合并于烧杯,置于 85°C 恒温 水浴锅中,使乙醇蒸发至 2〜3 mL, 搅拌均匀,放入沸水浴中糊化 15 mino 冷却后,加入 2 mL 冷的 9.2 mol - L-1 HClO4 , 不时搅拌,提取 15 min 后加蒸馅水至 10 mL, 混匀,离心 10 min, 上清液倾入 50 mL 容量瓶。再向沉淀中加入 2 mL 4. 6 mol - L-1 HClO4 溶液,搅拌提取 15 min 后加水至 10 mL, 混匀后离心 10 min, 收集上清液于容量瓶中。然后用水洗沉淀 1〜2 次,离心,合并离心液于 50 mL 容量瓶,用蒸馅水定容供测淀粉用。
3. 样品测定: 取待测样品提取液 1.0 mL 于试管中,再加蔥酮试剂 5 mL, 快速摇匀,然后 在沸水浴中煮 10 min, 取岀冷却,在 625 nm 下,用空白调零测定吸光度值,从标准曲线查出糖 含量(fJLg)。
4 . 结果计算:
、宀四人曰 丨 C X VTX0.9
淀粉含量® •「)=
式中一从标准曲线上査得的蔗糖浓度,卩 g - mL1 ; 卩丁一样品提取液总体积,mL;
峪一显色时所取样品液的体积,mL;
m 一样品重,mg;
0. 9 一由葡萄糖换算为淀粉的系数。

注意事项

1. 实验中的显色液是强酸溶液,使用中注意安全,不要溅到身上和设备上。


2. 实验过程中淀粉应充分分解为葡萄糖,否则实验结果会偏低。


3, 淀粉溶液加热后,必须迅速冷却,以防止淀粉老化,形成高度晶化的不溶性淀粉分子 微束。

来源:丁香实验

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