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皮肤和黏膜感染病毒标本的采集与处理

相关实验:皮肤和黏膜感染病毒及其检验

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简介

在临床上,皮肤和黏膜病毒感染分为两大类,即原发性感染和复发性感染。原发性感染主要发生于青少年和无特异性免疫力者,复发性感染则往往发生于成人和有免疫力者。

病毒在天然宿主体内介于原发性感染和复发性感染之间的一段时间,称之为潜伏性感染。潜伏感染(latent infection)是病毒的持续性感染状态。病毒感染人体后,病毒基因存在于一定的组织或细胞中,由于机体免疫功能足以将病毒局限化而不引起显性感染,也不出现临床症状,但又不足以将病毒清除,病毒便可长期潜伏下来,待机体免疫功能下降时,则可引起显性感染。

皮肤和黏膜是人体抗病毒感染的第一道防线。由病毒引发的皮肤和黏膜的病情可以是单独的皮肤疾病,或是伴发全身疾患,其治疗效果由患者病情严重程度而定。


病毒的分离培养仍为当前明确诊断皮肤和黏膜病毒感染的金标准。常见的标本有水疱液、咽喉拭子、阴道拭子、脑脊液或脑活检组织、角膜刮取物(角膜拭子)、痰液、唾液、血液、尿液等。

材料与仪器

器材:
①一次性无菌手套
②标本采集管
③棉签拭子


试剂:
①材料:待采标本
②缓冲液

步骤

皮肤和黏膜感染病毒标本的采集与处理的基本步骤可分为如下几种:


一、标本采集


1.水疱液 用无菌注射器针头从成熟的水疱中抽取液体至少1 ml,注入装有病毒运送液的灭菌小瓶中(可加适量抗生素),加盖密封,尽快冷冻保存;水疱样本采集部位用清水清洗,切忌用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。


也可用消毒针将水疱刺破,然后用无菌棉拭子蘸取疱疹液,迅速将棉签放入装有2 ml病毒保存液或Hanks液的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。新鲜水疱液病毒培养的阳性率大于70% ,脓疱液为70% ~80% 。


有时也可剪取新鲜水疱皮3~5 g迅速放入无菌小瓶中,加适量(2倍体积)50% 甘油或磷酸盐缓冲液,加盖密封,尽快送检。
在无法采集水疱液或水疱皮时,可采集脑脊液、唾液等样本。


2.阴道拭子 使用经消毒和干燥并不粘有任何化学物质或润滑剂的棉拭子、刮板或吸管取材。根据不同的检验目的而选取不同部位。一般采用生理盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道后穹隆、宫颈管口等处取材;或用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见,用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物,丢掉拭子,用新的菌拭子紧贴宫颈内道轻轻采样。


3.脑脊液 由临床医生严格按照腰椎穿刺术相应操作规程进行采集。一般选择患者第3和第4腰椎间隙或稍低处穿刺取得,儿童则于第4和第5腰椎间隙穿刺,必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。


4.角膜刮取物 在麻醉作用下,用无菌棉拭子从角膜边缘取材,立即送检。


5.唾液 混合性唾液容易采集,午后2~4小时,由受检者自行收集或由医务人员帮助采集。采集时需先用清水漱口,静息5~10分钟,弃去最初分物的唾液,将继续分泌的唾液收集于洁净的小杯内,至少需要2 ml。若唾液量不足,可嘱其做口舌运动,促进分泌。也可于舌下放一小块无菌干燥的脱脂纱布以使其吸收唾液,10分钟后取出,挤出唾液备用。


6.血液: 血液标本采集一般选用静脉采血法,通常采用肘部静脉。根据采血量不同,可选用不同型号的注射器。如遇患者采血后发生晕针,可让其平卧,休息片刻即可恢复。


7.尿液 选用清洁、干燥、较大开口的一次性容器,根据检验目的不同可选择晨尿、随机尿、餐后尿或计时尿。


二、标本处理


标本在病毒分离之前一般需要处理,有时也无需任何处理即可进行病毒的分离。标本处理的目的是提高病毒分离率,防止标本污染。脑脊液标本不需处理,可直接用于病毒的分离。疱疹液经青霉素、链霉素处理后直接用于病毒的分离。各种生物标本类似于组织标本,所以生物标本可以按组织标本的处理方法处理。

注意事项

(1)疱疹液采集后应立即送检,可在4 ℃暂存。未能及时检测的,应在-20 ℃以下低温冷冻保存,需长期保存的样本,应置-70 ℃或以下保存;阴道标本采集前24小时禁止性生活、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等,以免影响检查结果。
(2)在提取唾液样本前的30分钟内,请勿进食、饮水、吸烟或嚼口香糖。
(3)唾液标本收集后应立即送检,室温下放置后pH上升,细菌繁殖,容易析出沉淀,导致其化学成分发生改变。

来源:丁香实验

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