简介
肝炎病毒是指一组主要侵犯肝脏引起病毒性肝炎的病原体,其中有些也可引起脑、肺和心脏的损害。病原学来源不同的肝炎其实验室检测差异较大,病原学诊断主要涉及甲、乙、丙、丁、戊五型,包括各种肝炎病毒的核酸定性及定量,抗原组分及抗体等三个层次的检测,检查的目的是明确肝炎病因及病毒核酸复制的情况,以协助临床诊断和治疗、流行病学调查以及环境监测。
原理
目以 HAV 和 HBV 感染为例,HAV 感染的实验室检测主要包括三个方面:① 在潜伏期或急性期检查粪便中的甲型肝炎病毒抗原,因为量少且持续时间短,实际很少应用;② 检测发病早期和恢复期双份血清中的抗 HAV 抗体;③ 检测单份血清中抗 HAV IgM 抗体,以区别急性感染与既往感染。
HBV 感染的实验室检测主要包括四个方面:生物化学检测,HBV 血清标志物检测、HBV 分子生物学诊断以及 HBV 临床药物疗效检测。HBV 病原学诊断主要依据 HBV 血清标志物作出判断,包括病毒的抗原抗体及病毒的核酸两方面。
材料与仪器
器材:粪便、单克隆抗体技术
步骤
(一)免疫电镜检测病毒颗粒
采用固相免疫电镜技术:取患者潜伏期后期或发病早期的粪便上清液,采用单克隆抗体技术使 HAV 病毒颗粒聚集,病毒-抗体聚集物通过 A 蛋白或抗免疫球蛋白结合到铜网上。该技术较为敏感,但因其耗时。烦琐,昂贵且需要专业电镜人员,不适于大量标本的检测。
(二)检测抗原
HAV 具有很强的抗原性,并且只有一个抗原型别,对于检测 HAV 抗原十分有利。但由于粪便中排出 HAV 多出现于甲肝潜伏期末及发病早期,量少且持续时间短,因此不宜将检测 HAV 抗原作为诊断的主要病原学依据。
来源:丁香实验