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先天性白内障动物模型-手术造模法

相关实验:白内障动物模型

最新修订时间:

简介

先天性白内障是指出生前后即存在、或出生 1 年内逐渐形成的晶状体部分或全部浑浊。先天性白内障的发病机制复杂,大体可分为遗传因素、环境因素和原因不明三大类。先天性白内障动物模型多以大鼠造模。

原理

通过暂时阻断妊娠期 Wistar 大鼠子宫动脉血供的方法,建立因子宫缺血引起胎鼠产生先天性白内障的动物模型。

用途

该模型可用于人类先天性白内障的发生、发展等相关性研究。本实验方法操作简单,费用低,可行性高,胎鼠宫内缺氧时间易于掌握,重复性好。

材料与仪器

实验对象:

成年发情期雌性 Wistar 处女鼠和雄性 Wistar 大鼠。

实验器材:

注射器、止血钳、显微镜。

实验试剂:

水合氯醛。

步骤

先天性白内障动物模型-手术造模法的基本过程可分为如下几步:

A. 选用成年发情期雌性 Wistar 处女鼠 24 只,体重 200~220 g,雄性 Wistar 大鼠 16 只,体重 260~280 g。随机抽取雄性大鼠 4 只,雌性大鼠 6 只,以雌雄比为 3:2 同笼饲养在普通级饲养室,平均室温 23℃,噪声控制在 60 dB 以下,为大鼠提供足量、清洁的食物及饮用水,实验室用具及器械定期消毒。

B. 第 2 天观察母鼠,将阴道内发现阴栓或显微镜下发现精子者标记为怀孕 0 天,以后顺延,记录受孕日期。受孕雌鼠分笼饲养,饲养条件同前。

C. 造模大鼠腹部常规消毒,100 g/L 水合氯醛 0.5 ml 腹腔注射,3~5 分钟后实验大鼠即达麻醉状态。

D. 孕鼠取仰卧位并固定四肢,沿腹正中线切开皮肤,切口长 2.5~3.0 cm。分离皮下组织及肌肉,切开腹膜,轻轻拨开肠管,探查并暴露双侧子宫动脉。用止血钳钳夹双侧子宫动脉,根据实验需要 10~20 分钟后恢复血流,依次缝合腹膜,皮下组织及皮肤,待母鼠清醒后分笼饲养。子鼠出生后由母鼠或代母鼠喂养。

注意事项

将出生后 3 天仍存活的幼鼠记入存活例数中,随子宫动脉阻断时间的延长,胎鼠死亡率增高。

将实验鼠分成 A、B、C 三组,各组分别阻断子宫动脉的时间为 5 分钟,10 分钟,20 分钟组,其出生后乳鼠死亡率分别为 11%,19% 和 39%。

作者认为以阻断子宫动脉 10 分钟为建立胎鼠先天性白内障模型的最佳时间。

来源:丁香实验

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