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半乳糖性白内障模型

相关实验:白内障动物模型

最新修订时间:

简介

虽然糖尿病与白内障形成之间的相关性目前并不能充分阐明,但一个不容忽视的事实是,在糖尿病患者中,老年性白内障发病率更高,发病年龄更为提前,而且成熟更为迅速。在同一年龄段中,糖尿病老年性白内障摘出率数倍于非糖尿病者。半乳糖性白内障形成的基本病理过程同糖尿病性白内障。

原理

D-半乳糖诱发的大鼠半乳糖性白内障动物模型与半乳糖代谢异常有关,尿苷转移酶或半乳糖激酶缺乏,阻碍半乳糖衍生物向葡萄糖衍生物正常转化,同时在醛糖还原酶催化作用下,通过旁路代谢形成甜醇。甜醇不能透过晶状体囊膜,在晶状体内大量积聚,使晶状体内渗透压增加、吸收水分,引起晶状体纤维渗透性肿胀、崩解及坏死,从而导致晶状体水化、浑浊,出现空泡、空泡液化、继而出现点状、条状、楔状甚至片状沉淀-白内障形成。

用途

适宜进行人类半乳糖性白内障和年龄相关性,白内障机制与药物等相关性研究。

材料与仪器

实验对象:

SD 雄性大鼠和豚鼠。

实验器材:

注射器、检眼镜和裂隙灯显微镜。

实验试剂:

① D-半乳糖生理盐水溶液;

② 氯霉素眼药水;

③ 1% 新福林滴眼液。

步骤

半乳糖性白内障模型的基本过程可分为如下几步:

高半乳糖饮食法

A. 选用出生 30~40 日龄,体重 50~60 g 的 SD 雄性大鼠。用含有 50% D-半乳糖的饲料喂养大鼠,连续喂养 14 天,所有大鼠几乎可同时形成核性白内障。

腹腔注射半乳糖法

A. 选用出生 30~40 日龄,体重 50~60 g 的 SD 大鼠,雌雄兼用。D-半乳糖生理盐水溶液 (50% 半乳糖),使用前配制,常规灭菌后使用。每日腹腔注射 2 次,连续注射 14 天。同时,自由摄食 (标准饲料),饮用 5% 半乳糖水。

球后注射半乳糖法

A. 选用体重 460~900 g 豚鼠,雌雄不拘。将半乳糖粉剂配制成 0.4% D-半乳糖生理盐水溶液。球后注射,即固定豚鼠体位及头部,用 2 ml 注射器,安装皮试针头,在眶下缘外、中 1/3 交界处,结膜面进针,深度 2~4 mm,徐徐推入含有 0.4% 浓度的药液 0.2 ml,注毕快速拔出针头,点氯霉素眼药水 1 滴。

B. 每天给药 1 次,同时用 1% 新福林滴眼液散瞳,用检眼镜和裂隙灯显微镜观察晶状体变化情况。注射 10 次后 40% 的动物可产生环形浑浊,注射 26 次后,全部动物出现晶状体环形浑浊。

注意事项

用 D-半乳糖诱导的动物成模率高,可以大批量进行模型的制备,具有良好的重复性。该动物模型与糖尿病性白内障极为相似,与年龄相关性白内障也相似,其主要改变是晶状体皮质水电解质平衡失调而导致晶状体内水分聚集引起的晶状体纤维水肿、液化等病理性变化。

来源:丁香实验

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