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猪-大鼠异种角膜移植模型

相关实验:眼表及角膜病动物模型

最新修订时间:

简介

角膜损伤是致盲的主要原因之一,角膜移植是治疗角膜盲的唯一有效方法。虽然目前在美国及某些西方发达国家,角膜移植供体材料来源紧缺问题尚不明显。但是就世界范围而言,可用于移植的人角膜需求量远远大于供给,尤其像中国、韩国和日本等亚洲国家。异种角膜移植有望解决角膜供体材料来源紧缺问题。

原理

实验性异种角膜移植动物模型的建立是开展异种角膜移植的基本需要。

在异种移植中,由于供体和受体动物不属于同一品系甚至不是同一物种的动物,供体和受体角膜在厚度和曲率等参数上就会存在一定的差别。在角膜移植时,为了保证移植手术的成功,这就需要保证供体和受体角膜在厚度和曲率等方面尽可能一致。

一般来说,在移植前要对供体角膜进行适当的修剪或切削。由于在移植过程中,免疫排斥反应主要以角膜内皮细胞为主。因此在异种移植前,一般应首先考虑将内皮细胞削除,以角膜基质层作为异种移植供体角膜的基本组织。

用途

与家兔等小型动物相比,大鼠与人类的基因更相近。因此,用大鼠建异种角膜移植动物模型,其临床表现会更接近人异种角膜移植的临床表现情况。

材料与仪器

实验对象:

猪和大鼠。

实验器材:

11 号手术刀片、裂隙灯显微镜。

实验试剂:

① 戊巴比妥钠溶液;

② 盐酸丁卡因滴眼液;

③ 硝酸毛果芸香碱滴眼液;

④ 硫酸阿托品滴眼液;

⑤ 硫酸庆大霉索注射液;

⑥ 地塞米松磷酸钠注射液。

步骤

猪-大鼠异种角膜移植模型的基本过程可分为如下几步:

A. 用 11 号手术刀片的刀背刮除猪眼角膜的上皮层细胞至前弹力层,用 3.0 mm 角膜环钻钻至基质层与后弹力层处,将环钻钻得的角膜片用刀片轻轻剖取大约 150 μm 厚度作为供体植片,弃角膜内侧基质层、后弹力层和内皮层。

B. 按大鼠 3 mg/kg,用 2% 戊巴比妥钠腹腔注射全麻 + 0.5% 盐酸丁卡因滴眼液表面麻醉。

C. 用 2.5 mm 角膜环钻钻去麻醉状态大鼠全层角膜,1% 硝酸毛果芸香碱滴眼液缩瞳,将猪供体植片放入大鼠受体植床内,用 10-0 尼龙线间断缝合 8~10 针,至水密。无菌生理盐水形成前房。

D. 滴加 1% 硫酸阿托品滴眼液扩瞳,结膜下注射硫酸庆大霉索注射液和地塞米松磷酸钠注射液各 0.05 ml,0.5% 红霉素眼膏涂眼,4-0 尼龙线缝合眼睑。

E. 术后 72 小时拆除眼睑缝线并行裂隙灯显微镜检查,剔除浅前房、白内障、虹膜前粘连及术后前房消失等手术并发症鼠。

注意事项

此模型建成后,由于研究目的的不同,会存在是否使用抗免疫排斥反应药物、所用药效的强弱以及药物使用时间的长短等,眼前节检查临床的表现会有明显不同。

来源:丁香实验

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