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肺炎克雷伯菌肺炎模型(肺炎动物模型建模实验)

最新修订时间:

简介

吸入法建立克雷伯菌肺炎模型方法简单、重复性好,对研究抗生素对体内肺炎克雷伯菌的杀菌作用及其相关感染的发病机制及耐药机制,具有十分重要的价值。

原理

肺炎克雷伯菌肺炎模型的基本原理是肺炎克雷伯菌是存在于正常人肠道及呼吸道的重要的条件致病菌,它可黏附于机体腔道黏膜表面,分泌多糖基质,形成生物被膜。

细菌形成生物被膜后,常使感染变得难治、易复发。细菌形成生物被膜后,由于胞外黏多糖的屏障作用、通过影响宿主免疫功能及细菌的基因表达等作用,而使其对抗生素产生耐药。

材料与仪器

器材:

① 12 号钝头针头;

② 肺炎克雷伯菌菌种;

③ Wistar 大鼠等。

试剂:
① 乙醚。

步骤

肺炎克雷伯菌肺炎模型的基本过程可分为如下几步:
A. 肺炎克雷伯菌菌种,经增菌、增毒、鉴定、培养后稀释成 1x107 cfu/mL 的混悬液。
B. Wistar 大鼠,180~240 g,乙醚麻醉,并垂直固定大鼠,显露声门,用 12 号钝头针头插入气管内,注入细菌混悬液 0.1 mL(含细菌量 1x106 cfu/mL),保持垂直体位 5 分钟。

C. 动物在感染后 5~12 小时后出现运动不活泼、纳差、对外界反应迟钝、背部微弓,继而四肢瘫痪,肺部病变严重者出现呼吸表浅而急促,最后呼吸渐微弱而死亡。免疫学检查显示细胞免疫功能低下,CD3+、CD4+ 细胞减少,巨噬细胞吞噬功能明显降低。

肺组织病理学检查可分为 3 度,轻度表现为支气管和细支气管周围及肺泡内有渗出和中性粒细胞、淋巴细胞浸润,间质毛细血管充血;中度表现为多个细支气管及肺泡灶性炎症细胞浸润充血、出血;重度表现为片状炎症细胞浸润、充血、出血。部分动物肺淋巴结反应性增生,个别肺内出现小脓肿,肺水肿表现不明显。

来源:丁香实验

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